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1、PT&APTT,这是凝血功能监测中最常用的两个参数。尽管血栓弹力图相较于常规凝血检查有着不可替代的优势,并且在临床上已经越来越广泛地开展,但是传统的凝血功能检查仍然有着不可替代的简便性。我们就来看看PT&APTT。PT测定原理血浆凝血酶原时间(ProthrOmbinlime,PT),在被检血浆中加入钙离子和组织因子(TF或组织凝血活醐),使凝血酶原转化为凝血酸,后者使纤维蛋臼原转变为纤维蛋白,观测血浆的凝固时间。它是外源凝血系统较为灵敏和最为常用的筛查试验。PT的检测是针对枸椽酸抗凝剂处理后的血浆进行的,枸椽酸根离子与钙离子能形成一种难于解离的可溶性络合物,因而降低了血中钙离子浓度,使血液凝固
2、受阻。向血浆中加入含有凝血活酶的组织因子,再向处理好的脱钙血浆样品中加入磷脂和氯化钙,凝血过程开始启动,PT的测定以钙剂加入到血浆样本中开始计时,到血凝块形成为止。为了排除不同厂家试剂所造成的PT测定不同,我们可以根据试剂盒上的系数来计算国际标准化比值(INR),这样就可以将不同试剂所测出来PT进行比较。ApTT测定原理活化部分凝血活酹时间(aciivatedpartialthromboplastintime,APTT)是在37条件下,在受检血浆中加入APTT试剂(Xn因子激活剂和脑磷脂),以白陶土激活刈因子,最后加入钙离子后,观察血浆凝固所需的时间,即为活化部分凝血活酸时间,广泛用于内源和共
3、同凝血途径中遗传和获得性凝血因子缺陷的诊断,监测肝素抗凝治疗,检测抗凝抑制物,它对除Vn因子以外所有的凝血因子都很敏感。部分的意思是在试剂中有磷脂而没有组织因子。APTT试验首先需将血浆接触表面激活剂(如高岭土、硅藻土、硅酸盐,或二氧化硅)加入血浆,然后加入稀释磷脂(如脑磷脂),最后加入钙剂后开始计时,当血凝块形成后停止计时。PT或APTT延长,有什么意义?PT与APTT延长的组合可以总结为下表:遗传性先天性VH因子缺乏轻度VitK缺乏PT延长,APTT正第肝病获得性小剂量华法令获得性Vh因子缺乏狼疮抗凝物先天住VIII、IX、XI因子缺乏遗传性先天性Xn因子、前激肽释放酶、高分子呈激肽原缺乏
4、PT正常,APTT延长血管性血友病小剂量肝素荻得性VIII、IX、XI因子缺乏荻得性获得性血管性血友病狼疮抗凝物先天性凝血酶原、纤维蛋白原、V、X因子缺乏遗传性先天性多凝血因子缺乏肝病DIC过量的肝素、华法令严重VitK缺乏P1.APTT都延长肝素与华法令重建期间获得性苴接凝血的抑制剂(比如达比加群酯)X因子拮抗剂(比如利伐沙班)磷达肝美钠凝血酶原、纤维蛋白原、V、X因子拮抗制淀粉样变相关X因子缺乏PT或APTT缩短又代表着什么?在大多数情况下,PT或APTT的延长是样本采集与实验室操作不恰当造成的。另外,在恶性肿瘤、DIC、甚至是短时间运动后,都可能造成PT、APTT的延长,尤其是APTr更
5、容易受到影响。在除外干扰因素导致的PT或APTT延长后,有研究表明(见参考文献3、4)缩短的PT与APTT确实预示着血栓事件风险增加,但暂时没有证据支持仅根据PT与APTT的缩短来进行抗凝治疗,因此还是尽可能找到原发病再进行治疗。肝素为什么一般仅延长APTT?从原理上来讲,普通肝素可以作用于凝血过程中的多个因子,但最主要的是增强抗凝血酶(AT)的活性,来灭活X因子与H因子。随着肝素的分子量减小,低分子肝素、磺达肝葵钠等则对X因子的灭活要远强于II因子。在凝血过程中,X因子与II因子都是共同通路中的因子,那么为什么小剂量的肝素却不会影响PT呢?问题出在PT试验的试剂中。PT试验的试剂中含有特异中
6、和肝素的分子,可以将肝素结合掉,从而使肝素与抗凝血醯(AT)的结合减少。也就是说,是我们人为的不让肝素干扰PT试验,这样才可以让PT试验反映其它凝血异常,比如指导肝素与华法林的重叠使用。但是,当肝素量过于大时,PT试剂中的肝素无法完全被中和,就会影响PT的测定,造成PT与APTT都增大。华法林为什么监测PT/INR,而不是APTT?华法林是传统的VitK拮抗剂,可以减弱VilK依赖的“四兄弟”I1.VII、IX、X因子的活性,其中不乏共同通路中的凝血因子,从原理上来讲应该延长PT和APTT,为什么我们一般使用PT/INR来监测华法林呢?确实有华法林与APTT之间关系的研究,甚至有研究发现在IN
7、R=1.5-2.5之间时,PT与APTr有着良好的线性关系。但是,首先APTr没有像PT那样容易在不同试剂间统一,因为并没有INR这样的统一方法。另外,华法林对外源凝血途径的影响是大于内源凝血的。还有很重要的一点,我们知道华法林在刚开始使用时是会导致高凝的,而这时需要使用肝素直到INR达标,如果使用APTT监测的话就会极大受到肝素的干扰。评估凝血功能的重要指标之-APTT凝血功能是维持机体血液循环稳定的重要保障之一。而在凝血功能评估中,凝血时间检测(APTT)是一个关键指标。本文将深入探讨APTT的名称来源、检测原理、影响因素,以及对检测结果异常的原因分析和检验科与临床科室沟通的建议,带您全面
8、了解APTT检测的重要性及应用。APTT的名称来源APTT,即活化部分凝血活陋时间(ActivatedPartialThromboplastinTime)(,其中,部分凝血活酶试剂只含有磷脂,不存在含有凝血活酶的组织因子。它通过添加部分凝血活酶(一种磷脂类物质)和钙离子来活化血浆中的内源性凝血途径。这个测试评估了凝血因子刈、XI、IX和VnI的功能,这些因子是内源性凝血途径的一部分。因此,ApTT反映了这些凝血因子在体内被激活并导致血液凝固所需的时间。它是一个重要的检测,用于评估凝血系统的内源性途径是否正常运作。ActivatedPartialThromboplastinTimeIntrins
9、ic&FinalCommonPathwayActivator(egsilica/dlagcacid)ReagentsPhospholipidIntrinsicPathwayPatientsplatelet*prplasmaFinalCommonPathwayPatientsplatelet-prplasmaCalciumFibnnCo1OpticalDetectorAPTT的检测原理将磷脂与表面活化剂作为部分凝血活酶加入血浆,血浆样本与之共同孵育,带有负电荷的接触激活剂与缓冲液共同作用启动内源性凝血途径。37下孵育一定时间后,加入钙以触发凝血过程,测定血液凝固所需要的时间。APTT检测的原理主
10、要涉及到体外添加激活剂以启动凝血过程。通过监测血液凝固的时间,可以评估凝血因子的功能性状态。一般来说,APTT检测主要评估血浆中的内在凝血通路和共同凝血通路的活性。APTT检测的影响因素在实验室检测中,有一些因素可能会影响APTT的结果,包括但不限于:患者用药情况(如抗凝药物)、血浆采集和保存条件、试剂的质量和稳定性、抗凝比例不合适、以及实验操作技术等。因此,在进行APTT检测时,需要严格控制这些影响因素,以确保结果的准确性和可靠性。APTT检测结果的临床意义APTT延长:凝血因子FIX、FVIlI和FXl下降至正常值的30%40%,FI1.FV和FVn下降至正常值的30%以下时。大约有95%
11、的先天性出血性疾病与APTT延长有关。APTT延长亦可见于:血友病A、血友病B、血管性血友病综合征;普通肝素治疗、因子VHI、IX、XI的抑制剂、狼疮抗凝物(1.A)、DIC、稀释性凝血功能障碍、消耗性凝血病、纤溶亢进,新型口服抗凝药、纤维蛋白原缺乏、异常纤维蛋白原血症、新生儿等。其中,如果P1.T、BTPT、TT等凝血系统筛查实验都正常,ApTT延长提示存在血友病A或B,尤其在病史中其他相关数据也支持这一诊断时。用普通肝素治疗时,血浆肝素浓度为0.20.5Um1.时可使APTT基础值平均升高1.52.5倍。如果小于1.5,表明抗凝不足,血栓风险增加;如果大于2.5,提示有出血风险。低分子量肝
12、素主要拮抗FXa,因此存在低分子量肝素时,ApTT仅轻度延长(低分子量肝素抑制凝血酶能力低)。根据所使用的APTT试剂不同,重组水蛭素可以将凝固时间延长17%40%.APTT高于一定值时,将不再显示与水蛭素的线性剂量反应关系(平台效应),因此药物过量不会被识别。APTT缩短:可能是与采血不当(静脉受压过久)、标本处理不当(摇晃过重)或标本保存时间过久等分析前过程相关。因此,建议重采标本进行检测,如ApTT仍缩短,可能原因为:急性时相反应蛋白FV山活性增加、血栓栓塞风险增加、多种生物影响因素(如妊娠、甲亢、糖尿病、恶性肿瘤等)、DIC高凝血期、血栓性疾病(心肌梗死、不稳定性心绞痛、脑血管病变、V
13、TE、PE、妊高症等)。结语为了更好地理解和解释APTT检测结果,检验科与临床科室之间的沟通至关重要。建议检验科向临床医生提供详细的检测报告,包括样本采集条件、可能的干扰因素以及结果的临床意义。同时,也鼓励临床医生向检验科提供患者的临床信息、,可以更好地应用APTT检测,以便更准确地解读检测结果,并为患者的诊疗提供更精准的指导和决策支持,提供个性化的诊疗建议。凝血酶原时间(PT)检测及临床意义凝血酹原时(ProIhrombinIime,PT)是在体外模拟体内外源性凝血的全部条件,测定血浆凝固所需时间,是外源性凝血系统常用的筛检试验。PT最初被认为是凝血酶原(即凝血因子II)的特异性一期法检测项
14、目,但后来研究发现其对外源凝血途径及共同途径中所涉及的其他凝血因子(凝血因子V、VI1.X以及纤维蛋白原)质或量的异常、以及针对这些凝血因子的抑制物的存在都十分敏感。此外,PT也是监测口服抗凝药常用的检验指标,还可以反映中重度肝病和慢性肝病时的肝细胞损害程度,同时也是应用维生素K拮抗剂时的重要监测试验。检测原理37C条件下,在待检血浆中加入足量的组织凝血活酶(含组织因子、磷脂)和适量钙离子,通过激活FVn而启动外源凝血途径,使乏血小板血浆凝固。从加钙离子到血浆开始凝固所需的时间即为PTO检测方法(手工法)1 .试剂与器材1.1 组织凝血活醐浸出液常用人或兔脑粉浸出液;1.2 0.025mol1
15、.氯化钙溶液;1.3 秒表、塑料试管、塑料注射器。2操作2.1 在试管内加人109mmol1.枸椽酸钠溶液0.2ml,然后加入待检全血(或正常对照)1.8ml混匀,低速离心,分离血浆。2.2 取小试管1支,加入待测血浆和组织凝血活醐浸出液各0.1ml,37预温,再加入0.025mol1.氯化钙溶液0.1ml(氯化溶液也应预温在37水浴中),立即开动秒表,不断轻轻倾斜试管,记录至液体停止流动所需要的时间。重复以上操作23次取平均值,即为凝血酶原时间。2.3 同时按上法测定正常对照。参考区间1.PT值1.1 手工法:男性为11秒13.7秒,女性为1114.3秒,男女平均为(12.1)秒,测定值较正常对照值延长超过3秒以上有临床意义。不同实验室间参考区间可略有差异,建议各实验室自行进行参考区间的设定。1.2 仪器法:不同品牌仪器及试剂间结果差异较大,建议每个实验室制定自己的参考区间或对制造商提供的参考区间进行充分验证。2 .凝血酹原时间比值(PTR)PTR=患者PT(秒)/正常参比血浆PT(秒)PTR的参考区间通常为0.821.15(1.000.05)o3 .国际标准化比值(INR)INR=PTRISI,其中ISl为国际敏感度指数,INR的参考区间因ISI不同而异,一般在0.81.2。临床意义1.PT延长: