RNA结合蛋白Sam68 mRNA在原发性肝癌中表达及意义.docx

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1、RNA结合蛋白Sam68mRNA在原发性肝癌中表达及意义1 RNA结合蛋白Sam68mRNA在原发性肝癌中表达及意义RNA结合蛋白Sam68InRNA在原发性肝癌中表达及意义作者：马高祥傅利锋王涌吴育连【摘要】目的探讨RM结合蛋白Sam68mRNA在人原发性肝癌组织中的表达及意义。方法选取20例原发性肝癌的肿瘤组织及相应癌旁组织，采纳TRIzol一步法提取总RNA,采纳RT-PCR法检测San68mRNA在肝癌组织及相应癌旁组织中的表达。结果PCR产物电泳显示肝癌组织中Sam68mRN平均表达强度为60.71%9.26%,相应癌旁组织中Sam68mRNA平均表达强度为76.98%11.61%,

2、经配对t检验，P0.05,具有统计学差异。结论与相应癌旁组织相比，人原发性肝癌组织中Sam68mKNA的表达明显降低，提示在人原发性肝癌组织中San68的表达在转录水平受到明显抑制。【关键词】肝癌RNA结合蛋白聚合酶链反应AbstractObjectiveTodiscusstheexpressionofsam68inprimaryKeptocarcinomaantitssignificance.Methods20casesoftumortissuesandcorrespondingnear-tumortissuesofhumanprimaryhepatocellularcarcinomawer

3、ecollected.TotalRNAwasextractedfromspecimensusingTKlzolone-stepmethod,2theexpressionlevelofsam68inbothoftumortissuesandcorrespondingnear-tumortissueswereobservedwithreversetranctiption-po1ymerasechainreaction(RT-PCR).ResultsExaminedbyultravioletspectrophotometer,themeanexpressionlevelofsam68was60.71

4、%9.26%intumortissues,and76.98%11.61%innear-tumortissues.Bymatchdatatest,P1.8,证明提取的总RNA纯度较高，无蛋白质污染。经DNA测序，PCR产物序列与Sam68基因序列完全吻合，证明为Sam68基因扩增产物。PCR产物电泳显示（见图2,图3）本组20例，除2例呈阴性外，其余18例肝癌及相应癌旁组织均检出Sam68mRN表5达。其中，肝癌组织中Sam68mRNA平均表达强度为60.71%9.26%,相应癌旁组织中Sam68mRN平均表达强度为76.98%I1.61%,经配对t检验，PVO.05,具有统计学差异。3探讨Sa

5、m68作为STAR蛋白家族的代表成员之一，是20世纪末新发觉的一种RNA结合蛋白。Courtneidge和shalIoway通过探讨发觉该RNA结合蛋白的分子量是68Kda,在有丝分裂过程中是Src的底物，因此将其命名为Sam682,3oSam68主要定位于核内4,最新探讨显示，Sam68与肿瘤形成亲密相关。1.iU等57通过随机纯合子敲除法，用逆转录病毒为介导将反义RNA导入鼠纤维母细胞系NIH3T3,产生一种染色体基因失活的特别表型。检测显示，该特别表型的NlH3T3细胞所表达的Sam68水平不到野生型的25%,同时这些细胞的软琼脂集落形成率大大增加，表现出非锚者依靠性生长，缺乏细胞接触抑

6、制，并能够在裸鼠中形成转移性肿瘤。若将Sam68表达水平从25%人为提高到野生型的50%左右，可逆转部分细胞的肿瘤化生长状态，但这种逆转是不彻底的。上述探讨提示Sam68可能是一种肿瘤抑制剂。本探讨采纳半定量RT-PCR技术，首次对人原发性肝癌及相应癌旁组织中Sam68mRN的表达状况进行了检测。结果6显示,肝癌组织中Sam68mRNA平均表达强度为(60.71%9.26)%,相应癌旁组织中Sam68mRN平均表达强度为(76.98%11.61)%,经配对t检验，两组差别有统计学意义。从而表明与相应癌旁组织相比，人原发性肝癌组织中Sam68mRN的表达明显降低，提示在人原发性肝癌组织中Sam6

7、8的表达在转录水平受到明显抑制。这一结果与国外探讨一样57值得一提的是，木组中有2例样本，无论是肝癌组织还是相应癌旁组织，均未检测到Sam68mRNA的表达，推想膈旁组织可能存在Sam68基因缺失突变，或处于癌前期病变(2例均存在明显肝硬化),Sam68mRNA表达已经明显受抑，因样本量较少，无法得出结论。尽管有探讨表明Sam68在细胞增殖，分化和肿痛形成过程中发挥重要作用，但准确的生物学机制尚不清晰，其在肿痛发生发展过程中究竟扮演何种角色等问题，均有待于进一步的深化探讨。与相应癌旁组织相比，人原发性肝膈组织中Sam68mR的表达明显降低，提示在人原发性肝癌组织中Sam68的表达在转录水平受到

8、明显抑制。【参考文献】IJKool,VW,ZanneC.Terleth.Down-regulationofT-STAR1agrowthinhibitoryprotein,afterSV40mediatedimmortaIization.CellGrowthDiffer,72001,12:535541.2MFMoran,CAKoch,DAnderson,etal.Srchomologyregion2domainsdirectprotein-proteininteractionsinsignaltransduction.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.,1990,87:8622862

9、63SFumagalli,NFTotty,JJHsuan,etal.AtargetforSrcinmitosis.Nature,1994,368:871874.4Weng,SMThomas,RJRickles,etal.IdentificationofSrc,Fyn,and1.ynSH3-bindingproteins:impicationsforafunctionofSH3domains.Mol.Cell.Biol,1994,14:45094521.5C.Y.1.iu,A.Flesken-Nikitin,S.1.i,etal.InactivationofthemouseBrcalgenele

10、adstofailureinthemorphogenesisoftheeggcylinderinearlypostimpIantationdevelopment.GenesF)ev,1996,10:18351843.6K1.iu,1.1.i,PENisson,etal.Ncoplastic8IransfornRitionandtumorigenesisassociatedwithsam68proteindeficiencyinculturedmurinefibroblasts.J.Biol.Chem,2000,275:4019540201.7Q1.iu,UFischer,FWang,etal.Thespinalmuscularatrophygeneproduct,SMN,anditsassociatedproteinSIPlareinacomp1exwithSpliceosomalsnRNPproteins.Cell,1997,90:10131021