中药提取分离技术.docx

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1、中药提取分别纯化中草药提取液或提取物仍旧是混合物，需进步除去杂质，分别并进行精制。详细的方法随各中草药的性质不同而异，以后将通过实例加以叙述,此处只作一般原则性的探讨.一、溶剂分别法：般是将上述总提取物，选用三、四种不同极性的溶剂，由低极性到高极性分步进行提取分别。水浸存或乙醉浸育常常为胶伏物,难以匀称分散在低极性溶剂中，故不能提取完全，可摔人适量悟性填充剂，如硅辣上或纤维粉等，然后低温或自然干燥，粉碎后，再以选用溶剂依次提取，使总提取物中各组成成分，依其在不同极性溶剂中溶解度的差异而褥到分别。例如椅防己乙醇浸育，碱化后可利用乙隈溶出脂溶性生物减，再以冷苯处理溶出物防己碱，与其结构类似的防己诺

2、林碱比前者少一甲基而有一酚羟基，不溶于冷落而得以分别“利用中草药化学成分.在不同极性溶剂中的溶解度进行分别纯化，是最常用的方法。广而言之，自中草药提取溶液中加入另一种溶剂，析出其中某种或某些成分，或析出其杂质,也是一种溶剂分别的方法，中草药的水提液中常含有树胶、粘液质、蛋白质、糊化淀粉等，可以加入肯定量的乙醇，使这些不溶于乙酹的成分自溶液中沉淀析出，而达到与其它成分分别的目的。例如自中草药提取液中除去这些杂侦，或自白及水提取液中获得白及胶，可采纳加乙醉沉淀法；自簇新括楼根汁中制取天花粉素,可滴人丙酬使分次沉淀析出.目前，提取多毡及多肽类化合物,多采纳水溶解、浓缩、加乙醇或丙酮析出的方法.此外，

3、也可利用其某些成分能在酸或喊中溶解，又在加喊或加酸变更溶液的PH后，成不溶物而析出以达到分别。例如内酯类化合物不溶于水，但遇碱开环生成较酸盐溶于水，再加酸酸化，又重新形成内酹环从溶液中析出，从ifij与其它杂质分别:生物做一般不溶于水，遇酸生成生物碱盐而溶于水，再加碱碱化，又重新生成游齿生物减，这些化合物可以利用与水不相混溶的有机溶剂进行萃取分别.一般中草药总提取物用酸水、减水先后处理，可以分为三部分：溶于酸水的为碱性成分（如生物底）,溶于减水的为酸性成分（如有机酸），酸、碱均不溶的为中性成分（如俗醇）“还可利用不同酸、碱度进一步分别，如酸性化合物可以分为强酸性、弱酸性和酷热酚性三种，它们分别

4、溶于碳酸皴钠、碳酸钠和氢氧化钠，借此可进行分别，有些总生物碱,如长春花生物碱、石蒜生物碱，可利用不同小值进行分别。但有些特殊状况，如酚性生物减然重定减（Corydine）在软氧化钠溶液中仍能为乙蹄抽出，蝙蝠葛碱（dauricins）在乙健溶液中为氮氧化钠溶液抽出.而溶于缸仿溶液中则不能被氢氧化钠溶液抽出：有些生物喊的盐类，如四氯掌叶防已硬款酸盐在水溶液中仍能为氯仿抽出。这贱性质均有助于各化合物的分别纯化。二、两相溶剂萃取法：1.萃取法：两相溶剂提取又简称萃取法，足利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中安排系数的不同而达到分别的方法。萃取时假如各成分在两相溶剂中安排系数相差越大，则分别效率越高

5、、假如在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质，般多用亲脂性有机溶剂.如笨、氯仿或乙醴进行两相萃取，假如有效成分是偏F亲水性的物质，花亲脂性溶剂中难溶解,就须要改用弱亲脂性的溶剂,例如乙酸乙的、醉等。坯可以在筑仿、乙域中加入适量乙醉或甲繇以增大其亲水性.提取黄制类成分时，多用乙酸乙脂和水的两相萃取：提取亲水性强的皂贰则多选用正丁醉、异戊醉和水作两相萃取。不过.一般有机溶剂亲水性越大，与水作两相萃取的效果就越不好，因为能使较多的亲水性杂质伴随而出，对有效成分进一步精制影响很大.两相溶剂萃取在操作中还要留意以下几点：1先用小试管猛烈振摇约1分钟，视察萃取后二液层分层现象。假如简单产生乳化,大量提取时要

6、避开猛烈振摇.可延长萃取时间.如遇到乳化现象,可将乳化层分出，再用新溶剂萃取：或将乳化层抽泄，或将乳化层稍稍加热：或较长时间放置并时常旋转，令其自然分层。乳化现故较严峻时，可以采纳二相溶剂逆流连续萃取装置。2）水提取液的浓度最好在比重1.1-1.2之间，过稀则溶剂用量太大，影响操作.3）溶剂与水溶液应保持肯定量的比例，第一次提取时，溶剂要多一些，一般为水提取液的1/3,以后的用量可以少些，般14164）一般萃取34次即可.但亲水性较大的成分不易转入有机溶剂层时，须增加萃取次数,或变更萃取溶剂“萃取法所用设备，如为小量萃取，可在分液漏斗中进行：如系中砒萃取，可在较大的适当的F口胸中进行。在工业生

7、产中大量萃取，多在密闭萃取域内进行，用搅拌机搅拌肯定时间，使二液充分混合，再放置令其分层：有时将两相溶液喷雾混含，以增大萃取接触,提而萃取效率，也可采纳二相溶剂逆流连续萃取装置”2 .逆流连续萃取法：是一种连续的两相溶剂萃取法。其装置Ur具有一根、数根或更多的萃取管。管内用小说圈或小的不锈钢丝圈填充，以增加两相溶剂萃取时的接触面。例如用氯仿从川楝树皮的水浸液中萃取川楝素。将氯仿盛于萃取管内，而比更小于氯仿的水提取浓缩液贮于高位容渊内，开启活塞，则水浸液在高位压力卜流入萃取管，遇兖圈撞击而分散成细粒，使与氯仿接触面增大，萃取就比较完全。假如一种中草药的水浸液须要用比水轻的苯、乙酸乙酯等进行萃取，

8、则需将水提浓缩液装在萃取管内,而苯、乙酸乙酹贮丁高位容器内。萃取是否完全，可取样品用薄层层析、纸层析及显色反应或沉淀反应进行检查.3 .逆流安排法（CounterCurrentDistribution,CCD）：逆流安排法又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法.逆流安排法与两相溶剂逆流萃取法原理样，但加样址肯定,并不断在肯定容量的两相溶剂中，经多次移位萃取安排而达到混合物的分别”本法所采纳的逆流分布仪是由若干乃至数百只管子组成.若无此仪器.小量萃取时可用分液漏斗代替。预先选择对混合物分别效果较好，即安排系数差异大的两种不相混溶的溶剂。并参考安排层析的行为分析推断和选用溶剂系统，通过试验测知要经

9、多少次的萃取移位而达到真正的分别.逆流安排法对于分别具有特别相像性质的混合物.往往可以取得良好的效果.但操作时间长，萃取管易因机械振荡而损坏，消耗溶剂亦多，应用上常受到肯定限制。4.液滴逆流安排法：液滴逆流安排法乂称液滴逆流层析法。为近年来在逆流安排法基础上改进的两相溶剂萃取法。.对溶剂系统的选择基本同逆流安排法，但要求能在.短时间内分别成两相，并可生成有效的液滴.由于移动相形成液滴,在细的安排萃取管中与固定相有效地接触、摩擦不断形成新的表面，促进溶质在两相溶剂中的安排，故其分别效果往往比逆流安排法好。I1.不会产生乳化现象，用氮气压明动移动相,被分别物质不会因遇大气中氧气而氧化。本法必需选用

10、能生成液滴的溶剂系统，且时高分子化合物的分别效果较差，处理样品量小（1克以下），并要有有定设备,应用液滴逆流安排法曾有效地分别多种微量成分如柴胡皇瓜原小粱碱型季钱碱等。液滴逆流安排法的装置，近年来虽不断在改进，但装置和操作较搭.目前,对适用于逆流安排法进行分别的成分,可采纳两相溶剂逆流连续萃取装置或安排柱层析法进行。三、沉淀法：是在中草药提取液中加入某/试剂使产生沉淀，以获得有效成分或除去杂旗的方法。1 .铅盐沉淀法：铅盐沉淀法为分别某些中草药成分的经典方法之一.由于解酸铅及减式酣酸钳任水及醉溶液中，能与多种中草药成分生成难溶的铅款或络盐沉淀，故可利用这种性质使有效成分与杂质分别。中性静酸铅可

11、与酸性物质或某些酚性物质结合成不溶性铅盐。因此,常用以沉淀有机酸、氨基酸、蛋白明、粘液质、糅质、树脂、酸性皂忒、部分黄酮等.可与碱式错酸铅产生不溶性铅部或络合物的范围更广。通常将中草药的水或醉提取液先加入留酸铅浓溶液，静置.后滤出沉淀，并将沉淀洗液并入滤液，于滤液中加碱式谓酸铅饱和溶液至不发生沉淀为止，这样就可得到醋酸铅沉淀物、碱式醋酸铅沉淀物及母液三部分“然后将铅盐沉淀悬浮于新溶剂中，通以硫化级气体，使分解并转为不溶性磕化铅而沉淀。含铅盐母液亦须先如法脱铅处理，再浓缩料制。硫化氢脱铅比较彻底，但溶液中可能存有多余的硫化氮，必需先通人空气或二氧化碳让气泡带出多余的疏化级气体，以免在处理溶液时参

12、加化学反应。新生态的硫化铅多为胶体沉淀，能吸咐药液中的有效成分,要留意用溶剂处理收回.脱铅方法,也可用硫酸、磷酸、硫酸钠、磷酸钠等除铅，但硫酸铅、璘酸铅在水中仍有肯定的溶解度，除铅不彻底.用阳离r交换树脂脱铅快而彻底，但要留意药液中某也有效成分也可能被交换上去,同时脱铅树脂再生也较困难.还应留意脱铅后溶液酸度增加,有时需中和后再处理溶液,有时可用新制备的级较化铅、级铳化铝、级辄化铜或碳酸铅、明矶等代替醋酸铅、减式酣酸铅。例如在黄苓水煎液中加入明矶溶液，黄苓瓜就与铝盐络合生成难溶于水的络化物而与杂质分别，这种络化物经用水洗净就可干脆供药用。2 .试剂沉淀法：例如在生物碱盐的溶液中，加入某些生物碱

13、沉淀试剂（见生物碱性质下），则生物碱生成不溶性爱盐而析出.水溶性生物碱难以用萃取法提取分出，常加入雷氏傕盐使生成生物喊雷氏盐沉淀析出，又如枪皮瓜、芦丁、黄苓成、甘草皂忒均易溶于碱性溶液，当加入酸后可使之沉淀析出。某些蛋白质溶液，可以变更溶液的PH值利用其在等电点时溶解度最小的性质而使之沉淀析出。此外,还可以用明胶、蛋白溶液沉淀糅质：胆的静也常用以沉淀洋地货电代等.可依据中草药有效成分和杂质的性质，适当选用。四、盐析法：盐析法是在中草药的水提液中、加入无机盐至肯定浓度，或达到饱和状态，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而与水溶性大的杂质分别.常用作耗析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸铁、硫酸

14、核等。例如三七的水提取液中加晶酸铁至饱和状态，三七皂贰乙即可沉淀析出，自黄膝中提取掌叶防己碱，自三颗针中提取小菜减在生产上都是用猴化钠或硫酸按盐析制备。有些成分如原白头翁素、麻黄做、苦参减等水溶性较大，在提取时，亦往往先在水提取液中加入肯定接的食盐.再用有机溶剂萃取。五、透析法：透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜,而大分子物班不能通过半透膜的性质，达到分别的方法.例如分别和纯化皂忒、蛋白质、多肽,多融等物质时,可用透析法以除去无机盐、单糖、双糖等杂质。反之也可将大分子的杂质留在半透膜内，而将小分r的物质通过半透膜进入膜外溶液中，而加以分别精制：透析是否胜利与透析膜的规格关系极大。透析朕

15、的朕乱有大有小,要依据欲分别成分的详细状况而选择“透析膜有动物性膜、火棉胶膜、羊皮纸膜（硫酸纸膜）、蛋白质胶股、玻璃纸膜等。油常多用市售的玻璃纸或动物性半透膜扎成袋状，外面用尼龙网袋加以爱护，当心加入欲透析的样品溶液，悬挂在清水容器中。常常更换清水使透析膜内外溶液的浓度差加大,必要时适当加热,并加以搅拌,以利透析速度加快，为了加快透析速度,还可应用电透析法，即在半在半透脱旁边纯溶剂两端放置二个电极，接通电路，则透析腰中的带有正电荷的成分如无机阳离子、生物碱等向阴极移动，而带负电共荷的成分如无机阴离广、有机酸等则向阳极移动，中性化介物及高.分子化合物则留在透析股中.透析是否完全，须取透析膜内溶液

16、进行定性反应检查.一般透析膜可以自制:动物半透膜如猪、牛的膀胱膜、用水洗净，再以乙廉脱脂即可供用；羊皮纸膜可将酒纸浸入50%的诔酸15-60分钟，取出铺在板上,以水冲洗制得。其膜孔大小与磴酸浓度、浸泡时间以及用水冲洗速度有关：火棉胶膜系将火棉胶溶于乙J及无水乙醉，涂在板上，干后放置水中即可供用,其膜孔大小与溶剂种类、溶剂挥发速度有关，溶剂中加入适量水可使膜孔增大，加入少增杷酸可使膜孔缩小：蛋白质胶（明胶）膜可用20%明胶涂于细布上，阴干后放水中，再加甲醛使膜凝固，冲洗干净即可供用。近来商品有透析股管成品出也，国外习称ViskingDiaIysisTubingw,有各种大小厚度规格，可供不同大小分子缴的多糖、多肽透析时选用。六、结晶、揖结晶和分步结晶法：鉴定中草药化学成分.探讨其化学结构，必需首先将中草药成分制备成单体纯品“花常温下，物质本身性质是液体的化台物，可分别用分缁法或层析法进行分别精制。一般他说，中草药化学成分在常温卜多