PCR岗位技能考核试题及答案.docx

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1、PCR岗位技能考核试题一、选择题1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是（）多选题rA、目的基因B、引物VU四种脱氧核苜酸D、DNA聚掰等VE、mRNAF.核糖体2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一股为（）单选携广A. 0.3-1.mmo1./1.B. 0.5-1.mmoC. 0.3-2mmo1.1.D、0.5-2mmo1.1.D. 多由PCR需要的引物对为（）单选题*A、一对引物B、半对引物U两对引物D、多对引物V4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核铤核昔酸存在的条件下依赖于DNA聚合病的博促合成反应，其特异性决定因素为（）单选题）A、模板B.引物VUdNTPD,镁离子5、在PCR反

2、应中，下列哪项可以引起非把序列的扩增（）单选题rA、TaqDNA聚合旃加量过多B、引物加H过多C. A.B都可D、缓冲液中俵黑子含量过高6PCR技术的发明人是（）单选题A、MuIIisVB.史蒂文沙夫U兰德尔.才木7 .PCR产物短期存放可在（）保存.单选越*A、4c,C8 .常温U-80X6高温9 .PCR产物长期储存最好JS于（单选题J*A、4B、用温J20C10 PCR的基本反应过程包括（）单选题A、变性、退火、延伸B、变性、延伸U变性、退火11 .在实际工作中，基因扩增实鸵室污染类型包括（）单选题A试剂污染和标本间交叉污染B.扩增产物的污染C.天然基因组DNA的污染DA、B、C都可能1

3、1、PCR技术于哪一年发明（）单选题rA1983年B,1971年U1987年D. 1993年12.TaqDNA聚合酶SS促反应最快最适温度为（）单选题*A、37B、 50-55oCC、 70-75CD、 80-85oC13.以下哪种物质在PCR反应中不需要（）单选越）*A、TaqDNA聚合能B、dNTPsU镁离子D.RNA14.PCR检测中，经过n个循环的扩增,拷贝数将增加（）单选题A、nB、2nC.2nD、n215 .PCR基因扩增仪最关键的部分是（）单选题*A、温度控制系统B.荧光枪测系统U软件系统D.热盖16 .以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（）单选迤*A、各区合并VB、注意

4、风向J因地制宜D、方便工作17 .pcr实睑室一般包括（）单选版rA试剂准备区B.标本制管区U犷焙区和产物分析区DA.B.C都含18 .PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病苗的方法.若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（单选版-A、白细胞DNAB,病毒蛋白质U血浆抗体6耨毒核酸V19 .如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后QNA分子的数量将达到（）个.1单选题*A、10030B,100302U100302D,10023020 .PCR扩增产物的分析方法主要有（）单选题*A,凝胶电泳分析法B、点15校法&荧光探针定量

5、PCR法D、A、B、C都是V21 .阳性室内质控品出现的阴性失控的常见原因分析（）多选题*A、核酸提取中的随机误差，如核酸提取中的丢失，有机溶剂的去除不彻底,标本中扩增帔物的残留,所用耗材如濡心管有PCR抑制物等B、仪器的问题，如扩增仪孔间温度的不一致性，孔内温度与所示温度的不一致性等VC.试剂的问迭，如Taq酶和/或反转录函的失活，探针的纯度及标记效率和核酸提取试剂的效率等V22 .阴性室内质控品出现假阳性失控的常见原因分析（）多选地*A、扩增产物的污染VB、端床标本的核酸梃取过程中发生的样本间的交叉污染VC,移液枪头等关键耗材污染VD、试剂污染E,仪器故理23 .出现实验室污染怎么办？（）

6、多选题*A、开窗通风B、用次氨酸加溶液清洗地面，实验台、塔面C,增加紫外灯照射时间VD、用核酸清除剂空中喷雾等方法去除VE、每天进行上述过程，直到污染消除V24 .生物安全柜、超;争工作台、通风柜的区别（）多选题A,生物安全柜是为操作原代培养物、葭毒株以及诊断性标本等具有感染性的实脸材料时,用来保护工作人员、实验室环境以及实险品,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的.B、超净工作台是为了保护试睑品或产品而设计的通过吹过工作区域的垂直或水平层流空气防止试验品或产品受到工作区域外粉尘或细菌的污染.一旦海生物样品放首于工作区域,层流空气将把带有微生物介质的空气吹向前台工

7、作人员而产生危险.C.通风柜是为在化学实验过程中清序腐蚀性化学气体和有毒姻雾而设计的.分为夕卜接管道通风柜和净气型通风柜，净气型通风柜主要用于保护实鸵室人员免受有苗化学气体本口烟雾吸入危吉,也可用于防止粉末吸入危害VD、通风柜和起净工作台不属于生物安全柜,不可使用在涉及微生物材料的实验或生产过程中V二、判断题1.PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间取得平衡.对借2、在PCR反应中,dATP在DNA犷增中可以提供能贵，同时作为DNA合成的原料.对错3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解底.对借4、PCR反应中，豆性过程中引物与DNA模板链的结合是

8、依靠碱基互补配对原则完成，对V错5、PCR与细胞内DNA复制相匕匕所需要SS的最适温度较高.对V错6、PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等.对V7、PCR技术需在体内进行.对错V8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液.对V借9、核酸的豆制是由5,31方向进行的.对错10、配对的碱基总是A与T和G与C.对V错11,HBsAg转防性后一段时间才出现可检测的HBsAb,此段间隔职称之为“窗口期对错12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定员PCR的探针.对V偌13,PCR反应体系中Mg2+的作用是促进TaqDNA聚合酹活性.对错14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛）

9、,PK离子强度、Mg2+等有较大改变都会鲂响TaqSiS.对借15 .每个子代DNA分子中均保所一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链,这种复制方式称之为半保留宜制.（）单选地”对错16 .发生溶血的标本对PCR结果没影响.对错V17 .呼台效应是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和.对借18 .逆转录聚合筋链式反应（RT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA耨毒时,以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成CDNA适.然后以CDNA为模板进行正常的PCR循环增.对V猾19 .在定量PCR中，72工这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55C仍可充分延伸，完成扩增总制.对V借20 .PC

10、R可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面.对，21 .PCR方法检测GBS-DNA检测的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为95.05%、98.74%、92.31%W99.21%.22 .使用无菌拭子取生殖道、直肠样本进行GBS核酸检测.23 .GBS核酸样本在2-8保存条件下必需7天内检测完成24 .使用无菌拭子取生殖道、直肠样本进行GBS核酸检测.25 .内标对照CT值38或未播出，说明样本中含有PCR反应的抑制物，建议全新进行样本提取26 .20、喔烝匹定、氯叱格雷、普拉格雷通过抑制ADP受体,而发挥抗血版的作用.27 .氯叱格雷治疗可明显改善经皮冠状动脉介入治疗术（PCD术后

11、患者的主要心血管预后，但仍有5%15%的患者在1年内会出现包括死亡、心肌使死和脑卒中在内的临床终点事件.与CYP2C19基因多态性有关.对V借28 .氯毗格启通于前体药物，15%通过肝脏代谢后生成活性疏雷代谢物.对V错29 .CYP2C19基因分型检测可以使用肝素抗凝管采血.对借V30 .CYP2C19*2:是指5号外显子的第681位发生G-A突变；CYP2C19*3:是指4号外显子的第636位发生G-A突变.对错31 .CYP2C19基因型为13(2GG3GA),为中代谢，崎床可以考虑增加用药剂量或更换其它抗血小板药物.对借32 .抗血小板药物相关易因检测结合血栓弹力图实施个体化药物治疗，如

12、果发现基因型与表型存在矛盾，制定个体化给药方案时，应以基因型为主.对W33 .亚甲基四氢叶酸还原酶MTHFR是体内叶酸代谢当中的关键酶.对错34 .血清中同型半胱五酸的升高与MTHFR、MTR、MTRR前的活性降低有关.对V借35 .中国人群中，约29%的人MTHFR基因为677TT型.对错36 .MTHFRC677T发生纯合突变（TT型）后能的活性仅有正用的30%.对V错37,用于MTHFR基因检测的标本常温条件下可以保存3天.对错38 .核酸包括两种类型:脱氧核糖核酸（ATCG闲!核糖核酸（AUCG）.对V偌39 根据遗传中心法则，遗传信息的流动方向为：DNA=RNA=蛋白质.对错40.核

13、酸样品含量可根蛆260nm处波长的吸光度箕出.对偌41 .核酸样品纯度可根据(260/28Onm)处波长的吸光度比值算出.对错42 .Taq酶是决定PCR特异性的关梃因素.对错V43 .PCR中，全血样本采集T使用EDTA或枸榜酸砧抗源，不使用肝素抗凝.对V错44 .Taqman探针两端标记有:荧光基团和淬灭基团.对偌45 .dNTPs呈硒状，保存不当容易变性失活.对错46 .PCR基本反应过程包括:变性、退火、延伸.对V错47 .核酸基本结构单位是:核昔酸，其组成包括碱层、核糖或脱氧核糖和磷酸.对48 .DNA双犍中:碱基A-T之间以两个氢键相连,G-C以三个氢键相连.49核酸的解锌温度(T

14、m)与G+C含量有关，G+C含量愈大，Tm越低50 .核酸的复制是由5-3方向进行.51 .DNA变性的本质是双链间氢滋的断裂,52 .荧光阀值一股设JS为前3-15个循环的荧光信号标准差的10倍.53.CT值指扩增产物的荧光1吉号达到的阀值时所经过的扩增循环数.54 .初始模板浓度的对数与CT值呈线性关系，可以掴此进行定盘分析.55 .肝素是TaqDNA聚合的活性的强KP制剂.对错56 .PCR外源性内标可以监测取样、提取、扩增全过程.对W57 .新检测系统（常规应用前、常规使用期间（定期）、更换试剂、仪器、校准品溯源性改变、仪器假迁、设施、环境严歪失控等）情况下应进行性能鸵证.对V借58 PCR出现基线漂移的可能原因有:蒸发、探针水解、相邻荧光通道干扰等.对错59 .以次氨酸为主要成分的清洁剂在配制后24时内使用.对V猾60 .医疗废物垃圾袋结书原用：堡口颈“套才国1.对错.