PCR实验室气溶胶污染的清洁.docx
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1、PCR实验室气溶胶污染的清洁1、紫外照射实验室日常清洁过程中,均有紫外灯照射这一流程,紫外线照射清除DKA污染的原理:DNA链上相邻的嘀院在254nm的紫外照射下产生交联,形成嗑喏二聚体,该二聚体可导致合成反应时模板不能完全变性,同时聚合酶作用空间被阻碍,从而使合成反应终止。但是紫外线在去除PCR产物气溶胶污染中存在两个问题,首先,造成污染的扩增产物长度往往比较短,空间上,相邻喀茂出现的概率偏低,该方法作用有限,其次实骏室紫外灯照射强度与紫外灯功率,照射距离还有遮挡等因素相关,很多时候照射强度不够或存在照射不到的死余,均会影响清洁效果。因此紫外照射对PCR产物气溶胶的污染清除,只有辅助作用。2
2、、乙尊在日常实脸室清洁中,75席的乙尊是常用试剂,理论上来说,乙醇并不能清除DNA的污染,在实脏室清洁中乙醇往往是作为消毒剂使用。实际上在日常实览室清洁和去除气溶胶污染时,先用75%的乙醇对实验室空气进行密集喷淋,可对空气中的气溶胶产生较好的沉降效果,喷淋后立刻用其他DM清除试剂对实验台面,实验器具,地面等进行清洁,往往能取得较好的污染去除效果。器具用I1.no1./1.盐酸擦拭或浸泡,可使DNA脱嚓吟,但是分子实验室中可采用该方法的器具并不多,主要是玻璃器皿,同时对使用人有一定的危险性,因此采用的并不多。4、次氨酸钠和过氧化氢次氯酸钠和过氧化氢均具有强氧化作用,可氧化破坏DNA分子的结构,也是实险室中常用的气溶胶污染去除试剂,通常使用一定浓度的84消毒液或双氧水对实验室地面,台面及其他耐腐蚀器具等进行清洁,但也因其强氧化作用部分实险仪器器具,比如移液枪,不锈钢器具,离心机等不可采用这些方式进行清洁。5、其他核暧去除试剂随着PCR实脸越来越多的使用,市场上也出现了很多针对PCR产物污染的清洁产品,这些产品去除污染的原理有多种,如采用修饰法阻止合成酶的结合,或采用酶消化法降解,以及采用螯合法,进一步的有螯合后再降解去除等方式,对于这些试剂的使用,要先确认其使用场景,设计实验进行测试,以确认其效果,优缺点,采用适宜本实验室的试剂。
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