Trans‐BlotTurbo半干转印系统操作规程.docx

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1、Trans-BlotTurbo半干转印系统操作规程一、实验流程MidiTransfer PacksMiniTransferPacks阳极叠放在上端，使用右边指孔取出（Bottom+）阳极统一叠放在右端（BOltOn+）TopH（1）放置膜和下层耗材（阳极）在转印槽上（使用专用滚轮赶尽气泡；1块小胶或中型胶,请放置于转印槽中央；2块小胶，请并排放置，避免交叠）。（2）在膜的上方放置已电泳好的凝胶（转印前无需进行凝胶平衡，使用专用滚轮赶尽气泡）。（3）在凝胶上方放置上层耗材（阴极）。（4）使用专用滚轮赶尽气泡。（5）盖上转印盖并旋转上锁。将装配无误的转印卡槽插入全能型蛋白转印仪中开始实验。cass

2、etteelectrode (cathode)Topion reservoir stackBlottingNIWmembraneBottom (+)ion reservoirstack /Bottomcassette electrode (anode)GELSPER CASSETTE:1 MINI GEL 1 MINI TGX -9 MTNT P 1 MTT EL EDIT:UNTITLED25 LIMIT V ,2.5 CONST A -7 TIME (MIN) MFNll 1NATU_RUN二、仪器操作规程1 .开机后稍等片刻，会出现homeSCreen界面：NEW:用户可自定义程序LIS

3、T:包含预存程序和自定义程序TURB0:预存程序（使用转印包）2 .如果转印时用TurbO转印包，可选择“TURBO”，进入预存程序。根据胶的大小和种类可选择合适的程序。3 .如果在开机后，选择了“NEW”，用户可以自定义程序，并把自定义的程序储存起来（在LiSt位置）。TURBO可以同时储存25个用户自定义的程序。在此界面，用户可以选择恒压或恒流模式，可以输入电压值、电流值和转印的时间。4.如果在HOIneScreen的时候选择“LIST，可以使用预存和自定义程序。“LIST”mBIO-RADmIMINIGEL（左）or2MINIorIMIDIGEL（）然后可以根据自己的需求选择程序（非TU

4、RBo专用试剂，只能选择SrandardSD程序）：1）标准的半干转印；2）1.5mmGel的转印；3）高分子量蛋白质转印；4）低分子量蛋白质转印；5）混合分子量的蛋白质的转印；6）IminiTGXGel的转印。BIO-RADPROTOCOLLISTStandardS口25UTMT(IM1.5mmGel1.3ft-25卜1(MHIGHMUUfl-25y-1)MHOMEEDITRUN0三、使用注意事项为保证转印效果和保护TUrbaO半干转印仪，请在使用中注意以下事项：1 .上下两层请各使用1张超厚滤纸（2.4mm）或3张厚滤纸（0.8）,不建议使用普通滤纸。购买滤纸时请与供应商确认使用要求。2

5、.滤纸、膜和胶的大小应一致，滤纸不需要大于膜和胶。滤纸、膜和胶使用时需用转印缓冲液充分润湿和平衡。3 .滤纸使用时以不滴水为宜，不需要更不可以在滤纸-膜-胶-滤纸三明治上倾倒缓冲液。4 .对于非常小的胶块，比如远小于&5cmX7cmMiniGel的胶块，不容易控制转印条件，建议收集数块小胶块，用完整的滤纸和膜，在其间安放多块小的胶块，提高转印的总面积。胶块排列时将分子量大的部分朝向外缘。5 .转印应严格按照手册要求设定电流、限电压不超过25V和时间。转一块&5cmX7cmMiniGel胶，电流设定为1.3A,如胶面积小于MiniGe1,需按胶面积降低电流，降低的何种程度，需实验确定。转印时间与

6、目标蛋白分子量成正比，分子量小则减少时间。6 .上下两个抽屉如果要同时进行转印，必须放入面积相等的胶，运行相同的转印程序，不可运行不同的程序。7 .转印耗材在转印结束后会变热，请小心取出膜。8 .抽屉用完后，用软布清除残留的缓冲液，用需清洗，用干净的软布蘸清水擦洗，不可用水冲洗或浸泡。抽屉后面的金属触点上如粘有缓冲液，必须擦拭干净，以防生锈。抽屉清理干净，晾干后才能放回仪器中。9 .抽屉上盖的阴极不锈钢板如果氧化变黑，可用细沙纸/二氧化硅颗粒（金属抛光膏、成人牙膏）擦除黑色氧化物，或者使用时避开已经氧化的部分；抽屉里面的灰色阳极板不可用硬物擦拭。10 .抽屉上盖的阴极不锈钢板不可拆下，不要旋下上面的固定螺丝，这会造成抽屉报废。