实验室用水知识大全.docx

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1、实验室用水知识大全随着科学的发展，实验室各类仪器越来越精密，对于测试过程中使用的试剂、水的要求也越来越高。尤其是在实验过程中无处不用的实验室用水，更是重要。1纯水的分级标准实验室纯水可分为4个常规等级：纯水、去离子水、实验室11级纯水和超纯水。1.1 纯水纯化水平最低，通常电导率在150us/cm之间。它可经由单一弱碱性阴离子交换树脂、反渗透或单次蒸储制成。典型的应用包括玻璃器皿的清洗、高压灭菌器、恒温恒湿实验箱和清洗机用水。1.2 去离子水电导率通常在LO0.1us/cm之间。通过采用含强阴离子交换树脂的混床离子交换制成，但它有相对较高的有机物和细菌污染水平，能满足多种需求，如清洗、制备分析

2、标准样、制备试剂和稀释样品等。1.3 实验室11级纯水电导率L0Uscm,总有机碳(TOC)含量小于5.0X108以及细菌含量低于ICFU/矶。其水质可适用于多种需求，从试剂制备和溶液稀释，到为细胞培养配备营养液和微生物研究。这种纯水可双蒸而成，或整合RO和离子交换/EDI多种技术制成，也可以再结合吸附介质和UV灯。1.4 超纯水这种级别的纯水在电阻率、有机物含量、颗粒和细菌含量方面接近理论上的纯度极限，通过离子交换、RO膜或蒸储手段预纯化，再经过核子级离子交换精纯化得到超纯水。通常超纯水的电阻率可达18.2MQcm,T0C10ppb,滤除0.1Um甚至更小的颗粒，细菌含量低于ICFU/mJ超

3、纯水适合多种精密分析实验的需求，如高效液相色谱(HPLC),离子色谱(IC)和离子捕获-质谱(ICP-MS)o少热源超纯水适用于像真核细胞培养等生物应用，超滤技术通常用于去除大分子生物活性物质，如热源(结果为0.005IUmL)以及无法检测到的核酸酶和蛋白酶。目前世界上比较通用的纯水标准主要有以下几个：国际标准化组织(IS0),美国临床病理学会(CAP)试药级用水标准，美国测试和材料实验社团组织(ASTM),临床试验标准国际委员会(NCCLS),美国药学会(USP)等。同时，我国也有相应的纯水标准：中国国家电子级超纯水规格GB/T11446-1997和中国国家实验室用水规格GB6682-201

4、6等。因此市面上绝大多数的纯水系统，无论是进口的还是国产的，都是依据这些标准来设计流程的。2评价超纯水水质的常用指标2.1电阻率(electricalresistivity)超纯水电阻率的单位为MQ/cm(25),是衡量实验室用水导电性能的指标。超纯水的电阻率随着水内无机离子的减少而电阻加大，电阻率与电导率成倒数关系。实验室超纯水的标准：水的电阻率为18.25Mcm(25)。2. 2TOC总有机碳(TotalOrganicCarbon)ToC是超纯水中碳的的浓度，单位为PPnI或ppb,能够反映水中氧化的有机化合物的含量，对一些有机物实验影响较大。3. 3内毒素(EndotOXin)内毒素又称

5、之为“热原”，主要是革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片，其单位cfueu,去除内毒素的超纯水主要应用在生命科学方面。3水中存在的杂质3.1 可溶性无机物无机盐类、溶解气体、重金属、硬度成分(钙、镁等)3.2 可溶性有机物木质素、单宁、腐植酸、内毒素、RNA分解酶、农药、三氯甲烷、环境荷尔蒙物质、界面活性剂、有机溶剂3.3 微粒子铁锈、胶体、悬浮物、固体颗粒3.4 微生物细菌类、藻类4实验用水所要求的纯度所谓实验，是指对现象所推测的假设加以验证的动作。假设能否被证明为真理，与假设能否具有再现性的结果至关重要。实验的再现性除了要有良好的技巧，还受到所用化学试剂的纯度和分析仪器的精密度的影响。实验中用

6、来配置溶液的化学试剂，及所使用的水的纯度也非常重要。假设水中污染物对实验检测会造成影响，就必须去除这些物质。此外，为了取得良好的再现性结果，使用能保持稳定水质的纯水是必要的。随着实验用的分析系统灵敏度的提高，对水的纯度有了更高的要求。在水中，将距离ICIn的两片表面积为ICm2大小的电极加以通电，来监测两极间的导电率，通过所加电压和测得的电流能够获知两极间的电阻值，这个数值在水质分析中通常被称为电阻率或比电阻，其单位用MC.Cnl来表示。5纯水的应用目前纯水主要应用在两大领域：（1）生命科学应用领域方面。主要有：细菌细胞培养，临床生物化学，电泳，电生理学，酶联免疫吸附分析，内毒素分析，组织学，

7、水栽培，细胞免疫化学，哺乳动物细胞培养，介质制备，微生物分析，分子生物学，单克隆抗体研究，植物组织培养，放射性免疫分析等等。（2）分析和常规应用方面。主要有：蒸储水器供水，蒸汽发生器，玻璃器皿清洗，样本稀释和试剂制备，超纯水系统供水，固相萃取，普通化学，电化学，分光光度计，TOC分析，水质分析，离子色谱，火焰法原子吸收（Flame-AAS）,石墨炉原子吸收（GF-AAS）,高效液相色谱（HPLC）,液质联用（HPLC-MS）,电耦合等离子光谱仪（ICP-AES）,等离子质谱（ICP-MS）,痕量金属检测，气质联用（GC-MS）等等。6对水的纯度要求极高的几个主要应用（1）电泳：电泳用水最重要的

8、要求是生物活性物质诸如内毒素（通常小于0.05EUmL）,核糖核酸酶和蛋白酶（不可测定）的去除。最好用电阻率18.20cm,T0C10ppb,0.1Um或更小孔径的微滤以及细菌含量低于ICFU/矶的超纯水作为供水。内毒素分析：从分离到细胞培养的各种应用领域用水都要求规定内毒素指标，内毒素最大指标范围从0.25IUmL到0.03IUmL0对内毒素分析，适用少内毒素的超纯水，通常是0.05IUmL或更小。超滤是制造少内毒素超纯水的必须手段（国际上通常使用MWeO为5000道尔顿的超滤膜），而且可以结合UV等进行光氧化。（2）石磨炉原子吸收光谱：GF-AAS与其它原子吸收光谱测定的不同之处是，其火焰

9、炉被电子发热石墨管或棒替代，能在元素分析中达到很高的灵敏度。GF-AAS要求顶级纯水系统，提供PPt级的杂质水平，18.2MQcm的电阻率和低ToC水平。内置监测仪提供纯度保证，最终的水质指标是由良好的预处理系统，加上连续循环流路和纯水的超纯化而实现。（3）电感耦合等离子光谱仪：在ICP-AES应用中，对不同元素的灵敏度明显不同，但金属、过渡金属、磷和硫检测下限都在PPb范围内。ICP-AES对水的纯度要求相当严格，电阻率大于18。.Cm的超纯水是必须的，TOC的要求一般不太重要，前处理要求反渗透或离子交换。（4）电感耦合等离子光谱质谱联用：ICP-MS可被用于测定在PPt水平的元素。对这种灵

10、敏的ICP-MS分析工作，水的纯度要求非常严格，要求水中杂质在PPt水平，电阻率18.2Qc和较低的TOC。最终的水质指标是由良好的预处理系统，加上连续循环流路和纯水的超纯化而实现。（5）质谱分析：质谱能对混合物进行痕量分析，由于其高灵敏度，要求最高纯度的用水。所有的样本制备和前处理，例如固相萃取都需要超纯水。要求水中杂质在PPt水平，进行有机物分析时要求电阻率18.2Q.cm,非常低的TOC,一般指标小于3ppbo痕量金属检测：先进的现代分析仪器不断提升分析的灵敏度。痕量元素现在通过使用诸如ICP-MS技术，可测定在PPt和亚PPt水平的物质。痕量分析工作需要不含可测定成分的纯水，并且水质要

11、求适用于最严格最灵敏的ICP-MS工作。因此，空白试剂，标准样稀释和样本制备均需要纯度最高的超纯水，甚至需要在无尘室中操作。随着科技的发展，越来越多的应用开始要求使用纯度高的超纯水。7水的纯化技术7.1 微孔深层过滤对颗粒的通过设置了物理屏障，并根据过滤微细颗粒的大小分级，由缠绕纤维或压紧的物质形成多孔矩阵，通过吸附或捕捉方式截留颗粒。深层过滤器（一般为1-5OHm）通常作为一种经济的纯化方式用于截留大量的悬浮固体，并保护下游的纯化设备不被污染和堵塞。它们需要定期更换。7.2 活性碳吸附活性碳通常用于预处理系统以去除进水中的氯和氯胺，防止它们破坏过滤膜和离子交换树脂。大部分活性碳是由椰壳或煤在

12、有水蒸气和C02的条件下，经800IoO(TC煨烧而形成具活性的木炭，经过酸洗去掉残余氧化物和其他溶解物质。用于水处理的活性碳通常孔径范围在500100OnnI之间，每克比表面积大约100Om之，通常是颗粒状压缩成型的，并装填于纯化柱中以防止产生太过微细颗粒污染下游。活性碳的巨大表面和海量微孔以及吸附的物质，成为微生物的繁殖地。微生物的生长可以通过添加非溶解性生物杀灭剂到碳中，如银，得到部分抑制。活性碳柱需要定期更换以保持最少的细菌含量。7.3 反渗透(RO)反渗透膜通常用于滤除直径小于Imn的污染物，典型的反渗透方式可以滤掉水中90%的离子污染物，大部分有机物和几乎全部微粒污染物。反渗透对分

13、子量10ODa的非离子污染物的去除能力较低，而随污染物分子量的增大，RO膜的滤除能力也随之增强。理论上说，这种方式可以100%滤除300Da分子量的分子和包括胶体及微生物在内的颗粒，溶解的气体则无法靠RO膜去除。由于其出色的纯化功效，反渗透是一项对去除绝大部分杂质非常具成本效益的技术。不过，其产水速度相对较低，所以使用时通常配以储水箱暂存产成水以备使用或进一步纯化。反渗透装置保护后续系统免收胶体和有机物的堵塞或污染，其后续系统通常配备离子交换或电渗析装置。7.4 离子交换离子交换树脂床能通过与H+和0H-的离子交换，从水中有效去除离子。离子交换树脂是直径小于InmI的多孔小球，由交链的含有大量

14、功能强大的离子交换点的不溶性聚合物制成。水中的离子依据它们的相对电荷密度竞争离子交换树脂的交换点而被树脂吸附。树脂分为阳离子树脂和阴离子树脂两种。离子交换树脂床放在小型滤柱或大型滤筒中使用，一般使用一段时间后就要更换，此时阴阳离子交换基团已经替换了树脂中大部分H+和0H-的活性点。通过将RO膜设置在离子交换之前的方式，可得到更纯的水质并延长填料的使用寿命，该方法经常用于生产高纯度超纯水的实验室纯水系统中。这种方法也可避免离子交换树脂表面被大的有机物分子堵塞，从而降低其交换能力。7.5 电渗析电渗析（EDl）是一项结合了离子交换树脂和离子选择性通透膜，并结合直流电去除水中离子化杂质的技术。该项技

15、术的发展克服了离子交换树脂的局限性，特别是离子交换柱耗竭时离子杂质的释放及重填或再生离子交换柱的工作。水通过一个或多个在阳离子或阴离子选择膜之间填满离子交换树脂的管腔，在电场的作用下，离子在离子交换树脂间向管腔的两侧移动并进入另外的管腔，这个过程中也会电解产生维持树脂处于再生状态所需的H+和0H-。流向两侧独立管腔的离子被水冲刷掉。通常，EDI的产成水电阻率可达到5317C.cm（在25时），总有机碳含量（TOC）低于20ppb0由于系统内化学和电环境的作用抑制微生物生长，使细菌水平达到最小化。一般来说，EDI不能产生电阻率18.2.cm的超纯水。必须在EDI之后放置离子交换柱才可生产18.2

16、C.CnI的超纯水，并且因为水中只有极少数量的离子存在，所以延长了离子交换柱的使用寿命。7.6 蒸储蒸储法是通过改变水的形态一一从液态到气态再回到液态，将水和污染物分离。每一个转换过程都为纯水与污染物的分离提供了机会。理论上，除蒸汽压力与水接近的物质和共沸化合物，蒸储法能去除所有种类的水中污染物。像RO一样，蒸用法生产纯水的速度较慢，所以蒸储水必须先储存起来以备日后使用。蒸偏水器非常耗电一一每生产IL纯水通常耗费IkW电力。依据蒸储水器的不同设计，蒸偏水的电阻率大约能达到IMQ.cm,因为空气中的C02会溶入蒸储水中迅速降低其电导率。新鲜蒸偏水是无菌的，但如果保存不当，一段时间后就不再是无菌的了。7.7 微滤纯水系统中的微滤器对水中颗粒物和微生物进行物理性阻截。膜滤器完全根据颗粒的大小