血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙.ppt

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1、血型鉴定和交叉配血中血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理常见问题分析和处理 Click to add TitleClick to add Title 血型相容性检测血型相容性检测 受血者和供血者受血者和供血者AB0AB0血型是否相容血型是否相容 受血者和供血者受血者和供血者RhDRhD血型是否相容血型是否相容 主次侧交叉配血是否相容主次侧交叉配血是否相容 受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体第一部分第一部分ABO正反定型不符正反定型不符的原因分析和处理的原因分析和处理第二部分第二部分原因原因一、实验者操作技术的错误一、实验者操作技术的错误二、红细胞标本

2、问题二、红细胞标本问题三、血清标本的问题三、血清标本的问题原因原因 1.假假阴阴性结果性结果原因原因 2.假假阳阳性结果性结果患者近期接受了大量患者近期接受了大量ABOABO血型相容但不同型的红细血型相容但不同型的红细胞，如骨髓移植患者，或非胞，如骨髓移植患者，或非O O型人接受型人接受O O型红细胞型红细胞原因原因 某些某些ABOABO基因变异的个体或基因变异的个体或ABOABO亚型红细胞，一亚型红细胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABOABO抗原太抗原太弱，应用抗弱，应用抗A A、抗、抗B B试剂未能出现预期的凝集试剂未能出现预期的凝集反应反应原因

3、原因红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B B抗原红抗原红细胞或细胞或Tn/TTn/T多凝集红细胞，人血清抗多凝集红细胞，人血清抗A A、抗、抗B B试剂可能与这些异常的红细胞反应试剂可能与这些异常的红细胞反应原因原因使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血清中含针对抗血清中含针对抗A A、抗、抗B B试剂中染色剂或其他试剂中染色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应成分的抗体，出现假阳性反应原因原因患者血清中高活性、高浓度患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体冷自身抗体严重致敏（包严重致敏（包被）自身红细胞，以至自发地

4、发生凝集，而不是抗体被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致试剂的特异性免疫反应所致红细胞表面包被红细胞表面包被IgGIgG类抗体类抗体原因原因三、血清标本的问题三、血清标本的问题小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。原因原因三、血清标本的问题三、血清标本的问题免疫抑制疾病患者血清中免疫抑制疾病患者血清中ABOABO抗体减少或消失。老抗体减少或消失。老年人年人ABOABO抗体减弱抗体减弱4-64-6月龄内婴儿血清

5、中月龄内婴儿血清中ABOABO抗体阴性或很弱，一般抗体阴性或很弱，一般只测正定只测正定原因原因三、血清标本的问题三、血清标本的问题血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集，如白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特缗钱状红细胞的非特异凝集。异凝集。血清中含抗血清中含抗A A、抗、抗B B以外的其他红细胞抗体，如以外的其他红细胞抗体，如抗抗M M、抗、抗I I等。等。患者接受了患者接受了ABOABO血型不同的骨髓移植血型不同的骨髓移植原因原因三、血清标本的问题三、血清标本的问题患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体患者血清中

6、含有针对红细胞保护剂的抗体大量大量C 1C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗分子由于异常高效价的补体结合抗体抗A A、抗抗B B作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了A A、B B抗原抗原位点，不发生凝集位点，不发生凝集原因原因基本程序基本程序 1.1.重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误2.2.查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史3.3.彻底洗涤标本或试剂红细胞彻底洗涤标本或试剂红细胞4.4.应用抗应用抗ABAB、抗、抗A1A1、或抗、或抗H H检测红细胞检测红细胞5

7、.5.分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰体干扰6.6.室温孵育室温孵育30min30min后，离心观察结果，以检测弱的抗原后，离心观察结果，以检测弱的抗原抗体反应抗体反应7.7.做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰分析和处理分析和处理一、一、抗原表达减弱所致的抗原表达减弱所致的ABOABO正反定不符正反定不符 二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所致的血清的意外反应所致的ABOABO正反定不符正反定不符三、三、意外的血清学反应所致的意外的血清学反应所致的ABOABO正反定不

8、符正反定不符分析和处理分析和处理ABOABO正反定不符的分类正反定不符的分类一、抗原表达减弱所致的一、抗原表达减弱所致的ABOABO正反定不符正反定不符 血型抗原表达减弱的常见原因血型抗原表达减弱的常见原因ABO亚型红细胞亚型红细胞白血病或其他恶性疾病患者的红细胞白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原抗原太弱，应用抗太弱，应用抗A、抗、抗B试剂未能出现预期试剂未能出现预期的凝集反应的凝集反应新生儿新生儿分析和处理分析和处理抗原表达减弱所致抗原表达减弱所致ABOABO正反定不符的处理正反定不符的处理将抗将抗A A、抗、抗B B和抗和抗A A，B B试剂与洗涤过的红细胞在试剂与洗涤过的红细胞在

9、室温或室温或44孵育孵育30min30min，以增强抗原、抗体的结合，以增强抗原、抗体的结合用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞，以增用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞，以增强抗原、抗体的结合强抗原、抗体的结合应用抗应用抗ABAB、抗、抗A1A1、或抗、或抗H H检测红细胞检测红细胞分析和处理分析和处理一、抗原表达减弱所致的一、抗原表达减弱所致的ABOABO正反定不符正反定不符 用人血清抗用人血清抗A A、抗、抗B B进行吸收放散试验进行吸收放散试验，检测弱，检测弱A A、B B抗原，但不是所有单克隆抗体试剂都适宜做吸收放抗原，但不是所有单克隆抗体试剂都适宜做吸收放散试验，单克隆抗散

10、试验，单克隆抗A A、抗、抗B B必须经过系统验证，必须经过系统验证，且同时要做且同时要做O O型血吸收放散试验作对照型血吸收放散试验作对照检测唾液中检测唾液中A A、B B和和H H血型抗原物质血型抗原物质分析和处理分析和处理 获得性获得性B B红细胞红细胞 获得性类获得性类A A抗原抗原 混合视野凝集混合视野凝集抗体包被红细胞抗体包被红细胞分析和处理分析和处理二、二、抗抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反血清的意外反应所致的应所致的ABOABO正反定不符正反定不符 引起抗引起抗-A-A、抗、抗-B-B血清意外反应的因素血清意外反应的因素获得性获得性B B红细胞红细胞(特征特征)常出现在有

11、肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生在正常人在正常人通常只有通常只有A A 型人能出现获得性型人能出现获得性B B抗原抗原常伴有常伴有T T和和T nT n多凝集红细胞出现多凝集红细胞出现(细菌感染时细菌感染时)自身抗自身抗B B不与自身获得性不与自身获得性B B抗原反应抗原反应(无自凝现象无自凝现象)分析和处理分析和处理二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符获得性获得性B B红细胞红细胞(鉴定鉴定)调整人血清抗调整人血清抗B B试剂试剂pHpH至至6.06.0时，即不与获得性时，即

12、不与获得性B B细胞反应细胞反应分泌型者唾液中无分泌型者唾液中无B B血型物质血型物质乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常B B细胞不受细胞不受影响影响分析和处理分析和处理二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符获得性类获得性类A A抗原抗原 造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性TnTn抗原激活，类同抗原激活，类同A A抗原抗原 TnTn

13、和和T T一样属隐蔽行院抗原一样属隐蔽行院抗原,激活暴露后与所有血型的激活暴露后与所有血型的血清和人血清血型抗体出现凝集反应血清和人血清血型抗体出现凝集反应(全凝后多凝全凝后多凝)蛋白酶能降解蛋白酶能降解TnTn分子，消除与抗分子，消除与抗A A凝集反应性，而正常凝集反应性，而正常A A抗原不受影响抗原不受影响,也可通过也可通过ABAB血清证实血清证实分析和处理分析和处理混合视野凝集混合视野凝集非非O O型人近期输用型人近期输用O O型血型血骨髓移植后骨髓移植后A3A3细胞与抗细胞与抗A A呈典型的混合视野凝集现象呈典型的混合视野凝集现象单合子的镶嵌红细胞后双合子的交移体红细胞单合子的镶嵌红细

14、胞后双合子的交移体红细胞分析和处理分析和处理二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符抗体包被红细胞抗体包被红细胞 患患HDNHDN婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成人，其红细胞严重包被人，其红细胞严重包被IgGIgG抗体分子抗体分子 与含一定蛋白质浓度的试剂（抗与含一定蛋白质浓度的试剂（抗D D、抗、抗A A、抗、抗B B）产生凝集）产生凝集 45 45 放散后放散后，抗体解离，即可准确定型，抗体解离，即可准确定型二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的

15、ABOABO正反定不符正反定不符分析和处理分析和处理抗体太弱或消失抗体太弱或消失非正常高浓度的抗非正常高浓度的抗A A、抗、抗B B可引起前带现象可引起前带现象A2A2、A2BA2B或其他或其他ABOABO亚型人血清中可能有抗亚型人血清中可能有抗A1A1患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集分析和处理分析和处理引起意外血清学反应的因素引起意外血清学反应的因素三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正正反定不符反定不符冷自身抗体，如抗冷自身

16、抗体，如抗I I、抗、抗IHIH、抗、抗IAIA等等自身免疫性温型抗体自身免疫性温型抗体同种抗体同种抗体/意外抗体意外抗体分析和处理分析和处理引起意外血清学反应的因素引起意外血清学反应的因素三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正正反定不符反定不符 抗体太弱或消失抗体太弱或消失 如新生儿、老年人、免疫抑制患者，如新生儿、老年人、免疫抑制患者，应注意患者的年应注意患者的年龄和诊断龄和诊断非正常高浓度的抗非正常高浓度的抗A A、抗、抗B B可引起前带现象，导致假可引起前带现象，导致假阴性阴性,将血清稀释或用将血清稀释或用EDTAEDTA（2.52.5）处理可消除）处理可消除A2A2、A2BA2B或其他或其他ABOABO亚型人血清中可能有抗亚型人血清中可能有抗A1,A1,抗抗A1A1只凝集只凝集A1A1型红细胞而不凝集型红细胞而不凝集A2A2、O O型红细胞型红细胞 三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正反定不符及其处理正反定不符及其处理 患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类了大量大