Eppendorf-plus-移液枪校准方法.docx

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1、Eppendorfplus移液枪校准方法1、准备超纯水、万分之一天平（如果校正052.5ul量程的，至少要十万分之一的天平）、温湿度计、恒温室,还需准备一个小口容器，防止水分挥发。2、按移液器总量程的100%、50%、10%分别进行第三和第四步。3、吸头要反复吸取超纯水三次后，吸取固定容积的超纯水，推入放置在天平上的小口容器中，待数据稳定读取天平数值，同时记录温度。重复10次。4、将测量的数据用iso8655中的计算公式计算获得对应温度下的体积，取平均值。5、根据三个测量点的偏差，用移液器专用的校正扳手通过移液器的校正窗进行调整。6、重复3、4步，直至偏差在ISO8655的要求内为止。ISO8

2、655-1-2002活塞式容量测量仪器.第1部分:术语、一般要求和用户使用建议ISO8655-2-2002活塞式容量测量仪器,第2部分:活塞式吸量管ISO8655-6-2002活塞式容量测量仪器.第6部分:确定测量误差的重量分析法三、校准方法及步骤操作环境：温度应控制在15-30C,恒定在0.5C,相对湿度50%-80%,要保持较高的空气湿度以减少水分蒸发对结果造成的影响。建议使用防蒸发装置。测试应在独立无通风的房间内进行，并配备温度和湿度显示。所需设备：1.分析天平一台。确保室内空气流动平缓,应避免天平面寸空调出风口。根据所测试的移液器的容量来选择适合的天平：移液器容量范围天平可读性天平的重

3、复性和线性测是不准确度ll10l0.001mg0.002mg0.002mg10100l0.01mg0.02mg0.02mg100l0.1mg0.2mg0.2mg2、纯水、三蒸水或去离子水，需达到ISO3696三级水的标准。3、独立工作间，配备防震、防尘、远离热源、无阳光直射的操作台。4、温度计、湿度计。校准操作：为确保校准的准确性,采用三点移液十次,具体步骤如下：1.同温处理，将移液器、吸头、天平、测试用水、操作台等校准用具放置在同一工作间内，至少四小时。2、在正式操作前,先预洗吸头，吸排测试用水5次。3、用最大体积、50%最大体积和最小体积（或10%最大体积）,各移液10次,记录每次移液的质

4、量。4、计算每组数据的平均值，代入计算公式，计算出不准确度与不精确度。5、对比可允许的最大误差限度，根据实际需要确定进行调整。附：相关计算公式质量体积转换公式1:V=（w+e）Z式中:V=体积（l）W=质量（mg）e二蒸发损失（mg）Z转换因子以上公式参考ISO8655标准。蒸发损失对测量小体积液体影响较大,因此应将蒸发损失计算在内。方法：在称过重的容器中注入定量清水，按下秒表观察30秒，读出损失量，然后算出每秒的损失量。（若30s内质量损失3mg,则损失量为3mg30s=0.1mgs）o记录移液时间，将移液时间乘以每秒损失量，算出实际蒸发损失量，代入上述公式计算实际体积。若使用防蒸发装置,通

5、常可以忽略蒸发损失量。不同温度、压力下水的质量和体积不同，具体转换因子Z值请查看附录L公式2:V20=mK（t）式中：Vzo=标准温度20。C下实际体积（l）m=质量（mg）K（t）值以上公式参考JJG646-2006移液器检定规程。根据天平测试蒸储水的质量，以及检测时温度所对应的K（t）值，即可计算出标准温度下蒸储水的实际体积。具体K（t）值请查看附表2o计算式时，请根据实际需要，选择公式进行计算。不准确度（系统误差）不准确度是指实际移取体积和显示体积的差异。A=-V0式中：A二不准确度二平均值VO二标称容量A%=lOO%AVo不精确度（随机误差）不精确度指每次实际移取体积与实际体积平均值的

6、差异,其变化是不可预计的测量误差的一部分。它可以表示为标准差S或变异系数CV:n_aVVi-V式中：S=标准偏差=平均值n二测量次数Vi=单次测量数值CV=100%S/附表1:转换因子Z(lmg)数值表(无菌水)温度气压(KPa)IKPa=IOhPa()80859095100101.310515.001.00171.00181.00191.00191.00201.00201.002015.501.00181.00191.00191.00201.00201.00201.002116.001.00191.00201.00201.00211.00211.00211.002216.501.00201.

7、00201.00211.00211.00221.00221.002217.001.00211.00211.00221.00221.00231.00231.002317.501.00221.00221.00231.00231.00241.00241.002418.001.00221.00231.00231.00241.00251.00251.002518.501.00231.00241.00241.00251.00251.00261.002619.001.00241.00251.00251.00261.00261.00271.002719.501.00251.00261.00261.00271.

8、00271.00281.002820.001.00261.00271.00271.00281.00281.00291.002920.501.00271.00281.00281.00291.00291.00301.003021.001.00281.00291.00291.00301.00311.00311.003121.501.00301.00301.00311.00311.00321.00321.003222.001.00311.00311.00321.00321.00331.00331.003322.501.00321.00321.00331.00331.00341.00341.003423

9、.001.00331.00331.00341.00341.00351.00351.003623.501.00341.00351.00351.00361.00361.00361.003724.001.00351.00361.00361.00371.00371.00381.003824.501.00371.00371.00381.00381.00391.00391.003925.001.00381.00381.00391.00391.00401.00401.004025.501.00391.00401.00401.00411.00411.00411.004226.001.00401.00411.0

10、0411.00421.00421.00431.004326.501.00421.00421.00431.00431.00441.00441.004427.001.00431.00441.00441.00451.00451.00451.004627.501.00451.00451.00461.00461.00471.00471.004728.001.00461.00461.00471.00471.00481.00481.004828.501.00471.00481.00481.00491.00491.00501.005029.001.00491.00491.00501.00501.00511.0

11、0511.005129.501.00501.00511.00511.00521.00521.00521.005330.001.00521.00521.00531.00531.00541.00541.0054附表2:K(t)值表(=0.00045oC)水温K(t)水温K(t)水温K(t)cm3gcm3gcm3g15.01.00421318.41.00326121.81.00243615.11.00418318.51.00323521.91.00241415.21.00415318.61.00320922.01.00239115.31.00412318.71.00318422.11.0023691

12、5.41.00409418.81.00315822.21.00234715.51.00406418.91.00313222.31.00232515.61.00403519.01.00310722.41.00230315.71.00400619.11.00308222.51.00228115.81.00397719.21.00305622.61.00225915.91.00394819.31.00303122.71.00223816.01.00391919.41.00300622.81.00221616.11.00389019.51.00298122.91.00219516.21.0038621

13、9.61.00295623.01.00217316.31.00383319.71.00293123.11.00215216.41.00380519.81.00290723.21.00213116.51.00377719.91.00288223.31.00211016.61.00374920.01.00285823.41.00208916.71.00372120.11.00283423.51.00206816.81.00369320.21.00280923.61.00204716.91.00366520.31.00278523.71.00202617.01.00363720.41.00276123.81.00200617.11.00361020.51.00273723.91.00198517.21.00358220.61.00271424.01