血清镁（Mg）二甲苯胺蓝法测定血清无机磷（Pi）磷钼酸法测定.docx

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1、血清镁（Mg）二甲苯胺蓝法测定1 .实验原理二甲苯胺蓝（XyIidyIBlue）染料结合终点比色法。在碱性条件下，镁离子和二甲苯胺蓝形成紫色络和物。加入GEDTA和钙形成络和物，使本反应可特异监测镁。紫色深浅和镁浓度呈正比。pHll.OMg24+二甲苯胺蓝紫色复合物2 .标本采集2. 1病人准备：无特殊要求。2.2类型：血清、血浆、脑脊液或尿液，不可使用EDTA血浆。3 .标本存放：血清/血浆稳定性：425C保存可稳定7天；-20C保存可稳定1年。尿液稳定性：4-25C保存可稳定3天；-20C保存可稳定1年。用数滴浓盐酸调节尿液PH值到34,然后用蒸储水作1+4稀释；检测后结果乘以5。4 .标

2、本运输：室温条件下运输5 .标本拒收标准：细菌污染、溶血的、抗凝剂不合要求的标本不能做测定。6 .实验材料：6.1上海申能镁测定试剂盒（货号：11146171701试剂：8X7Oml）6.1.1试剂组成乙醇胺缓冲液pHll.0lmolL乙二醵酸二胺四乙酸（GEDTA）60mmolL二甲苯胺蓝110mmolL表面活性剂适量6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28,若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4变质指示：当试剂变色或有浊度时，表明已变质或有细菌污染，均不能继续使用。6.1.5注意事项：应采取必要的预防措施使用试剂。6.2

3、校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6 .3质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7 .仪器：奥林巴斯AUIOoO生化分析仪8 .操作步骤8.1项目基本参数：参见AIHoOO生化分析仪项目测定参数.SOP文件8 .2仪器操作步骤：参见AUloOO生化分析仪操作规程.SOP文件9 .检验结果的判断与分析10 .质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与11质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。11 .计算方法

4、：以TrUCalU复合校准品镁校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。12 .参考值范围血清/血浆：新生儿0.48zz1.05mmolL儿童0.600.95mmolL女性0.771.03mmolL男性0.731.06mmolL尿液：35mmol24h脑脊液：0.85L35mmolL（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13 .临床意义J?】，镁缺乏是常见的功能失调，由营养不良、吸收不良、肾损伤和内分泌失调等所致。与镁浓度下降相关的并发症有神经肌肉过度

5、兴奋（如：震颤，癫痫发作）和心脏病症状（例如心动过速，心律失常）。镁浓度下降常伴随着钙和钾水平的下降，低血镁被认为可能是低血钙症的起因。镁浓度升高可见于脱水，肾功能失调和服用大量抗酸剂的患者，并与神经肌肉反应低下和低血压有关。14.操作性能14 .1线性范围：0.022.05mmolLo14.2精密度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AUlOOO批内重复性小于3%,总不精密度小于3%o用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20X(mmolL)S(mmolL)CV(%)批间精密度n=20X(mmolL)S(mmolL)CV(%)样品10.780.008

6、0.92样品10.760.0081.09样品20.970.0080.87样品20.990.0121.12样品31.660.0120.83样品31.700.0251.4314.3方法学比较：本公司的试剂盒（y）与某商品化试剂盒（x）,同时对81个样品进行Mg检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=l.01-0.012mmolL;r=0.999,14.4灵敏度：本试剂的检测限为002m）lLo14 .5病人结果可报告范围：0.02-2.05mmolL,如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以215 .超出范围结果处理：本法线性上限为2.05In

7、mOI/L。如样品测定值超过上限时.，应将样品用09%氯化钠溶液作1：4稀释，重新测定，结果乘以516 .病危报警值的处理当血清镁测定值3.0InmoI/L或0.5InlnOl/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17 .方法局限性17.1本法线性上限为2.05mmolLo如样品测定值超过上限时，应将样品用09%氯化钠溶液作1：4稀释，重新测定，结果乘以5。17 .2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704molL,胆红素浓度684molL,甘油三酯浓度22.6InmOl/L,钙浓度6.24molL时没有观察到干扰。由于红细胞内镁含量很高，故溶血对测定有干扰。18 .补救措

8、施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19 .参考文献1. ThomasL,editor.Clinicallaboratorydiagnostics.led.Frankfurt：TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.231-41.2. EndresDB,RudeRK.Mineralandbonemetabolism.In：BurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofclinicalchemistry.3ded.Philadelphia：W.B.SaundersCompany;1999.p.13951457.3.

9、MannCK,YoeJH.Spectrophotometricdeterminationofmagnesiumwithl-Azo-2-hydroxy-3-(2.4-dimethylcarboxanilido)-naphthalene-l-(2-hydroxybenzene),AnalChimActa1957;16：155-60.4. BohounC.Microdosagedumagnesiumdansdiversmilieuxbiologiques.ClinChimActa1962;7：811-7.5. SitzmannFC.Normalwerte.Munchen：HansMarseilleV

10、erlagGmbH：1986.p.166.20.其他，仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清无机磷(Pi)磷铝酸法测定1 .实验原理磷铝酸紫外终点比色法。钥酸钱+硫酸+磷龄挤磷铝酸络合物；该络合物在340nm有最大光吸收峰。在340nm的吸光度与标本中无机磷的浓度成正比2 .标本采集2. 1病人准备：无特殊要求。2.2类型：血清、肝素血浆或尿液。3 .标本存放：血清/血浆稳定性：425保存可稳定7天；-20C保存可稳定3个月。尿液稳定性：425C在pH5保存可稳定2天；不可使用已被污染的标本。收集24h尿液时，应在收集瓶中加入1O%(WV)盐酸IOml,以防

11、止磷酸盐沉淀。测定前尿液应用蒸镭水作1：20稀释，测定结果乘以21o4 .标本运输：室温条件下运输5 .标本拒收标准：细菌污染不能做测定。6 .实验材料：6.1申能无机磷测定试剂盒(货号：11252071701试剂：870ml)6.1.1试剂组成硫酸210mmolL钳酸核0.4mmolL表面活性剂适量6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存试剂避光保存于225,若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5注意事项：试剂中含硫酸，如与皮肤及粘膜接触，请仔细地用大量水冲洗。应采取必要的预防

12、措施使用试剂。6 .2校准品：使用DiaSyS公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7 .3质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件8 .仪器：奥林巴斯AUlOOO生化分析仪9 .操作步骤8 .1项目基本参数：参见AU100O生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见AU100o生化分析仪操作规程.SOP文件9 .检验结果的判断与分析10 .质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP

13、文件。11 .计算方法：以TrUCalU复合校准品磷校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。12 .参考值范围血清/血浆成人：0.841.45mmolL儿童/青少年：130天1.252.50mmolL1-12个月1.152.15mmolL13岁1.001.95mmolL46岁1.051.80mmolL79岁0.951.75mmolL1012岁1.051.85mmolL13-15岁0.95L65mmolL16-18岁0.85L60mmolL尿液：12.942.0mmolL（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有

14、所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13 .临床意义：无机磷在体内多数以磷酸盐形式存在，主要为骨骼的无机成分，但是在细胞中也以磷脂和核酸形式存在，如腺甘三磷酸（ATP）还参与体内的能量转换。血浆中的无机磷呈磷酸钙的形式，因此血浆无机磷的水平与钙水平息息相关。血清或尿液中无机磷的检测主要用于肾功能失调，骨骼和甲状旁腺疾病等的诊断。在肾功能衰竭、甲状旁腺功能减退、假性甲状旁腺功能减退以及骨骼和细胞内磷酸钙流失时，无机磷浓度上升。因吸收不良、甲状腺功能亢进和维生素D缺乏时，无机磷浓度下降。同时进行钙监测可获得更多的信息。14.操作性能14 .1线性范围：0.234.84mmolL14.2精密度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AUlOOO批内重复性小于3%,总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20X(mmolL)S(mmolL)CV(%)天间精密度n=20X(mmolL)S(mmolL)CV(%)样品11.430.0261.87样品11.400.0422.99样品22.720.0230.85样品22.650.0873.32样品33.490.0421.20样品33.420.1002.9514.3方法学比较：本公司的试剂盒（y）与某商品化试剂盒（x）,同时对59个样品