人转铁蛋白TRF酶联免疫分析试剂盒使用说明书.docx
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1、人转铁蛋白(TRF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本成剂盒仅供研究使用。检测范围:96T20molL-650molL使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中转铁蛋白(TRF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人转铁蛋白(TRF)水平。用纯化的人转铁蛋白(TRF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入转铁蛋白(TRF),再与HRP标记的转铁蛋白(TRF)抗体结合,形成抗体-抗原-施标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成ZUi终的黄色。颜色的深浅和样品中的转铁蛋白(TRF)呈正相关。用防标仪
2、在45Onm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人转铁蛋白(TRF)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20mlXl瓶7终止液6mlX1瓶2酶标试剂6mlXl瓶8标准品(1200molL)0.5mlXl瓶3酶标包被板12孔X8条9标准品稀释液L5ml1瓶4样品稀释液6mlXl瓶10说明书1份5显色剂A液6mlXl瓶11封板膜2张6显色剂B液6mlXl/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验若不能马上进行试验,可将标本放于-2(C保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物前的(HRP)活性。操作
3、步骤1 .标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。600molL5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液300molL4号标准品150IJJ的5号标准品加入150标准品稀释液150molL3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液75molL2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液375molL1号标准品150Hl的2号标准品加入150l标准品稀释液2 .加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然
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