PCR实验室污染的原因分析、处理及整改措施.docx

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1、PCR实验室污染的原因分析、处理及整改措施2022年5月29日中午12:30开始PCR实验室假阳性频率增高,考虑可能出现实验室污染，检测工作立即停止，首先，查找污染源和明确污染范围。经排查本次实验室污染的主要来源可能是部分配置好的反应体系放置时间过久、实验室二区出现扩增产物的污染。一、发生污染的原因分析。1.核酸检测工作频次过高，导致每批样本检测之间没有足够时间消毒。2、核酸检测人员短缺，检测人员需要多次往返二区、三区，极容易导致扩增产物的污染。二、实验室污染的处理：1 .生物安全柜的操作台消毒处理：使用5000mgL含氯消毒剂进行喷洒消毒。消毒液需要现用现配，24小时内使用。2 .实验室台面

2、、地面、物体表面等的消毒处理：立即使用润湿有5000mgL含氯消毒剂的毛巾擦拭、消毒。清洁、消毒通风系统滤网。采用房间固定和可移动紫外灯进行紫外照射2小时以上。3 .清理污染物时：严格遵循活病毒生物安全操作要求，采用压力蒸汽灭菌处理，并进行实验室换气等，防止次生危害。整改措施：1.严格实验室功能分区确保实验室人、物及空气单向流动核酸检测实验室的人、物及空气流向按照试剂储存和准备区一样本制备区T扩增和产物分析区，防止扩增产物随人流、物流及空气进入扩增前的区域。空气流向应按照从试剂储存和准备区一样本制备区一扩增区一扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行。2、力口强实验室检测安全管理(1)基本要求

3、核酸检测应当在生物安全二级实验室进行，并应在生物安全风险评估的基础上，采取适当的个体防护措施，包括手套、口罩和隔离衣等。开展新冠病毒核酸检测的实验室应当制定实验室生物安全相关程序文件及实验室生物安全操作失误或意外的处理操作程序，并有记录。(2)实验室前安全要求应使用2000mgL含氯消毒剂或75%酒精进行桌面、台面及地面消毒。消毒液需每天新鲜配制，不超过24小时。转运至实验室的标本转运桶应在生物安全柜内开启。转运桶开启后，使用2000mgL含氯消毒剂或75%酒精对转运桶内壁和标本采集密封袋进行喷洒消毒。取出标本采集管后，应首先检查标本管外壁是否有破损、管口是否泄露或是否有管壁残留物。确认无渗漏

4、后，推荐用2000mgL含氯消毒剂喷洒、擦拭消毒样品管外表面(此处不建议使用75%酒精，以免破坏标本标识)。如发现渗漏应立即用吸水纸覆盖,并喷洒有效氯含量为5000mgL的含氯消毒剂进行消毒处理，不得对标本继续检测操作，做好标本不合格记录后需立即进行密封打包，压力蒸汽灭菌处理后销毁。如为采样管为非灭活管，实验室操作人员在进行标本热灭活时，温浴前需旋紧标本采集管管盖，必要时可用封口膜密闭管盖；温浴过程中可每隔10分钟将标本轻柔摇匀1次，以保证标本均匀灭活；温浴后标本需静置至室温至少10分钟使气溶胶沉降，随后再开盖进行后续核酸提取。(3)核酸提取和检测安全要求标本进行核酸提取和检测时应尽可能在生物

5、安全柜内进行操作。如为打开标本管盖或其他有可能产生气溶胶的操作，则必须在生物安全柜内进行。(4)实验室结束后清洁要求。需要对实验室环境进行清洁，消除可能的核酸污染。实验室空气清洁。实验室每次检测完毕后，可采用房间固定和/或可移动紫外灯进行紫外照射2小时以上。必要时可采用核酸清除剂等试剂清除实验室残留核酸。工作台面清洁。每天实验后，使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行台面、地面清洁。生物安全柜消毒。实验使用后的耗材废弃物放入医疗废物垃圾袋中，包扎后使用02%含有效氯消毒液或75%酒精喷洒消毒其外表面。手消毒后将垃圾袋带出生物安全柜放入实验室废弃物转运袋中。试管架、实验台面、移液器等使用75%酒精进行擦拭。随后关闭生物安全柜，紫外灯照射30分钟。转运容器消毒。转运及存放标本的容器使用前后需使用02%含氯消毒剂或75%酒精进行擦拭或喷洒消毒。塑料或有机玻璃材质物品清洁:使用02%含氯消毒剂或过氧乙酸或过氧化氢擦拭或喷洒。(5)转运容器消毒转运及存放样本的容器使用前后需使用有效氯含量为0.2%的消毒剂或75%酒精进行擦拭或喷洒消毒。