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1、临床谷胱甘肽还原酶试剂盒反应原理及临床意义谷胱甘肽还原酶(GR)是人体氧化还原体系中最为重要的酶之一,广泛存在于人体肝、肾、心红细胞、单核巨噬细胞等组织细胞中。它可及时地清除人体代谢过程中产生的氧自由基(OFR),是维持细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)含量的主要黄素酶。谷胱甘肽氧化还原系统稳态能维持细胞正常生理过程,维护筑基蛋白和酶的活性,而GR是唯一能将氧化型谷胱甘肽(GSSG)转化为GSH的酶。在预防血管内皮损伤方面,GR可以及时清除人体代谢过程水平的中产生的活性氧,有助于预防高浓度活性氧造成的血管内皮损伤。谷胱甘肽还原酶试剂盒的反应原理紫外酶法:在NADPH存在下,谷胱甘肽还原酶高度特异性
2、催化降解氧化型谷胱甘肽GSSG,NADPH被氧化成为NADP,该反应引起340nm处的吸光度值减少,谷胱甘肽还原酶的活性可通过测定340nm处吸光度值减少的速率来测定。临床意义生理性升高:剧烈运动、进餐、饮酒、新生儿GR水平生理性增品JO病理性增高或降低:肝胆疾病、物性肝损伤等会引起GR水平的增高,维生素B2缺乏症、缺铁性贫血、心脑血管疾病和糖尿病等引起GR水平的降低、使用还原型谷胱甘肽制剂抑制GR而降低。GR参与反应生成的还原型谷胱甘肽对保护肝细胞膜完整具有重要意义。还原型谷胱甘肽是一种常用的保肝药物,在肝细胞受到有害物质和病毒侵袭初期,机体内大量产生GR,参与肝细胞膜的修复过程。不同于丙氨
3、酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)在肝细胞膜破裂和线粒体破裂时才能检测出来,GR可以填补肝细胞受损早期自我修复阶段至破裂进程中诊断的空白,将更有利于早期肝炎的诊断和治疗。急性肝炎早期阶段,血清谷胱甘肽还原酶敏感性高,相关研究显示,血清GR水平每增加1U/L,肝损伤风险升高L086倍loGR比转氨酶更早增加达到峰值,是判断早期肝脏损伤的指标。肝硬化早期阶段GR会因个体差异有不同程度的升高,但在肝硬化晚期,GR表现往往为正常,原发性肝细胞癌和广泛转移性肝肿瘤时,血清GR显著升高。血清GR的监测能有助于判断亚临床药物性肝损伤(DILI),提高临床药物性肝损伤的诊断率并指导用药,在药物性肝
4、损伤的肝功能监测指标中,GR与ALT、AST、GGT.ALP、LDH的相关系数分别为0.464、0.612、0.322、0375、0.543,与AST的相关性最高,GR对DILI的诊断敏感度为87.39%AUC达到0.941,仅次于ALT及AST,特异度达到95.00%,是所有肝功能指标中最高的,分阶段分析,在DILI早期由于机体氧化应激作用GR的产生会更早于ASTALTo需要注意的是肝损伤在使用还原型谷胱甘肽针剂及片剂治疗时,血清GR会受到抑制。GR与ALT、AST同时升高,提示进入肝损伤爆发期,建议临床治疗干预;GR升高,ALT、AST下降,提示正在进行肝损伤修复,可以结合三者评估临床治疗
5、情况;当三者都出现下降,有两种可能情况:一是修复完成,临床好转;二是重型肝炎出现严重情况,出现胆酶分离现象。缺铁性贫血患者GR活性下降,血红蛋白浓度对GR活性的影响较大,GR活性随着贫血程度的加重而下降,显示机体抗氧化能力下降。心脑血管疾病和糖尿病患者血谷胱甘肽还原酶水平明显低于同龄健康人群,动脉粥样硬化患者抗氧化作用减弱,改善机体氧化还原状态对控制心脑血管疾病具有积极作用,低GR活性是发生缺血性脑卒中的独立危险因素。GR活性每增加1U/L,发生缺血性脑华中的风脑险就降低8.4%,当GR最佳截断值为58.5U/L时,其诊断缺血性脑卒中的灵敏度为0.97,特异度为0.57。糖尿病急性并发症者的血清GR水平均显著低于慢性并发症及无并发症者,慢性并发症者则显著低于无并发症者。血清GR与2型糖尿病患者糖化血红蛋白水平及糖尿病并发症发生情况呈负相关。此外,GR在评估个体营养状态、及指导肿瘤化疗病人治疗进程方面也具有重要作用,维生素B2缺乏症又名核黄素缺乏症,是一种比较常见的营养缺乏病,临床上可导致患者GR活性低下,因此,GR可作为评估维生素B2水平的灵敏指标。在肿瘤化病人中,血清中GR的含量升高可使用合适的抑制剂,可明显增加耐药的敏感性,有助于达到更好的化疗结果。