2024成人呼吸系统感染性病原诊断（附图表）.docx

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1、2024成人呼吸系统感染性病原诊断(附图表)呼吸道病原学检测标本的采集方法呼吸道病原学标本的采集方法见表Io表1呼吸道病原学标本类型及采集方法标本类型采集方法痰液自主咳痰，诱导痰拭子口咽拭子，鼻咽拭子保护性毛刷经支气管镜引导下采集经人工3道内吸引收集分滂物经人工气道,在负压吸引装置前连接无菌集痰器，操作前应听诊痰液聚集部位，必要时给予体位弓流或物理H眼，以增力麻本的采集量支气管肺泡灌洗液根据病变部位选择葡先叶段，使用生理盐水在M段或亚段进行灌注并回收，通过细胞计数进行灌洗液质量控制，回收率应在30%以上胸腔积液细菌培养标本量应1m1.,真菌培养10m1.,分枝杆菌培养10m1.如送检结核感染T

2、细胞检测(T-SPOT)还需注意添加肝素抗凝组织活检标本可选择电视辅助胸腔镜手术，气管-支气管内超声引导下肺组织或淋巴结活检，经气管镜肺活检术，CT或B超引导下经皮肺穿刺活检术。标本的运送、储存和预处理1.标本的运送和储存原则首先标签应准确，信息完整，贴在容器上，而不是容器盖上。不同病疑似生物恐怖病原体标本原体检测标本的采集和转运原则见表2o病原体标本及采集方法髓装置、保存温度和凝需氧菌培养E域、体液或灌洗液等无菌容器，室温,立即行拭子标本（次选）：推荐使用鬻%5玄K样量大，易拭子转运管，室温，2h内厌氧菌培养t组织、体液及灌洗液等无菌厌氧瓶，室温，立即送检拭子标本（次选）：推荐使用植绒尼龙拭

3、子（采样量大，容厌氧拭子转运管，至温，2h易洗脱，检出率高）内真菌培养组织、体液及灌洗液等无菌容器，室温，2h内拭子标本（次选，仅适用于酵母菌和浅表部位MTB感染）拭子转运管，至温，2h内病毒培养组织、体液及灌洗液等病毒转运培养基，冷藏保存立即送检拭子标本：推荐使用植绒尼龙佳主城加1.结去旧0.拭子（采样量大，容易洗脱，智田拭子转迈吕，至皿，2h检出率高）内表2不同病原体检测标本的采集、收集和转运原则应遵守国家关于此类标本的采集要求（可参考美国疾病预防控站httpsemergency制中心网cdc.gov/labissues/index.asp)不同类型标本采集量、保存和转运时间见表3。表3不

4、同时间标本的采集量、保存和转运时间标本类型标本采集量收集装置.保存温度和转运时间州清学标IOm血液或5m血清耍身分鹦瞥采血管，不至国,2h内抗原或抗血液、胭脊液、尿液等（根宓汗!去哭玄:曰7h内体检测据实验室的具体要求）3团合造，至皿，h内核酸扩增10m血液或5ml血浆翡11A采血管-室温12ml病毒转运培养基密闭容器，室温，2h内2.针对不同病原体的检测方法标本采集后应及时进行质量控制，合格的标本应尽可能短期内送检。某些特殊病原体标本的转运、保存和检测方法见表4。表4特殊病原体标本的转运、保存条件及检测方法特殊病原体标本转运条件和时间标本保存条件检测方法细菌无菌容器，室温，2h4,24h革兰

5、染色，定量培养努卡菌革兰染色，弱抗酸染色，培养军团菌培养，核酸检测，抗原检测真菌无菌容器，室温，2h4,24h氢氧化钾压片或荧光白染色，真菌培养曲零氢氧化钾压片或荧光白染色，真菌培养，半乳甘露聚糖（GM）蟠肺泡子菌六胺银染色,核酸检测，抗原检测隐球菌墨汁染色，真菌培养，隐球菌荚膜多糖抗原分枝杆菌无菌容器，室温，2h4,24h涂片抗酸染色,培养，核酸检测病毒病毒转运培养基，SMf2h4,5d核酸检测，抗原检测，分离培养寄生虫无菌容器，室温，2h4,24h直接镜检，核酸检测，抗原检测病原特殊结构辘HiSS荚膜染色，1.oeffler多色亚甲蓝辘鞭毛银盐染色法，复红染色法芽抱孔雀绿染色法，石碳酸蕃红

6、染色法呼吸道病原体检测方法的优缺点不同检验方法的优缺点见表5o表5病原体不同检测方法的优缺点检测方法优点缺点然合醵错反应（如宜接PCR.mPCR、RT-PCItqPCR）简单，快速，便宜，可定量假阳性率高，污染风险高，引物可能失效，用于诊断常见和某些特殊病原体（如肺抱子菌、m窗核分枝杆菌等）等温（恒温）扩增技术（1.AMP.NASBA.RPAfflSDA）快速，敏感，特异假阳性率高，污染风险高,引物可能失效，用于诊断常见和某些特殊病原体芯片技术（多病原等温扩增微流控芯片技术、PoCT等）快速，敏感，特异，污染率低大部分检测仍需在扩增前进行样本和速算提取，无需PCR认证未完全实现样品前处理自动化

7、杷向通用引物多重PCR和一代酒序（如16s、ITS）肥向NGS宏基因组NGS血清学试验（如浦联免疫和免疫层析等检测）涂片显微镜检查病原体培养引物可能失效，诊断某些特定病原体，难以区分可对病原体按昭科属种进定植微生物和病原微生物，测序文庠构建复杂，黑要喘器普黑F进可诊断某些特定的病原体，价格昂贵印时，有英,三埋身，司0可触礴种污染，难以区分定植雌物fi三原微生物瑞露W器原露露槊可能存在宿主核酸亏染,价格昂贵as时（23器喝嘴鬻屋髀寓d），有可能被环购种浮染,难以区分定植微嚣蠹翻胃寸有助于发现生物和病原微生物血清特异性抗体检测在感染早期可能呈假阳性，包括对血清特异性抗体检测和需要采集急性期和恢复期

8、双份血清进行检测解快速抗原检测，价格便宜，可果评价;体液免疫缺陷会导致假阳性，受一些因诊断急性感染素影响也可能会出现假阳性结果；抗原检测结果不受机体免疫状况影响，但准解较低快速（数分钟至数小时），可通过计算分析标本中各种微生瞿器蠹需蠡臂界敏感度及特异度低,受酗乍毓的限制据疑诊病原体采取特殊染色进行诊断经京，标本容易收集，并可结敏感度及特异度低，无法检测非培养病原体,某合体外药敏试验结果为治疗提些病原培养十分耗时，某些病原微生物培养困难供有用的信息或无法进行体外培养基质辅助激光解析电第-飞行时间质谱技术敏感度高，培养后检测快速需要病原体培养结果和改病原体蛋白谱注：PCR:聚合酶链式反应；RT-P

9、CR:实时逆转录PCR;mPCR:多重PCR;qPCR:实时荧光定量PCR;1.AMP:环引物介导的等温扩增；NASBA：核酸序列扩增；RPA:重组聚合酶扩增；SDA:链置换扩增；POCT：即时检验或床旁检测；ITS：内部转录间隔区；NGS:二代测序技术病原检测结果的判读及其临床价值病原学检查结果的判读应该综合考虑患者的年龄、基础疾病、免疫状态、临床特点、病情严重程度以及先期的抗感染治疗等情况。1 .直接抗原快速检测胶体金法病毒抗原快速检测方法简便、快速、成本低。病毒抗原快速检测的特异性较好，但存在敏感度低、假阴性率较高的问题。当临床高度怀疑为病毒感染，但病毒快速检测结果为阴性时，应加做病毒核

10、酸检测，以排查假阴性。2 .血清特异性抗体检测适合在门诊、急诊或基层医院用于病原体的筛查。但由于早期阳性率较低，需要采集急性期及恢复期双份血清进行检测和效果评价，但体液免疫缺陷的患者可呈假阴性。3 .涂片所获取的各种标本均应行病原学涂片检查。在结果判读时，需要结合患者的临床症状和影像学表现，排除操作过程或环境污染的可能。BA1.F离心沉淀后六胺银染色、抗酸染色和革兰染色可分别用来检测肺抱子菌、分枝杆菌和部分细菌等。肺穿刺标本和胸腔积液涂片发现病原体对确诊具有重要意义。4 .培养在进行痰培养前必须确定是合格痰标本，并排除操作不当或环境污染的情况。定量培养有助于区分致病菌和定植菌。5 .核酸分子扩增检漏和基因芯片检测核酸分子扩增及等温扩增基因芯片检测等方法可实现快速分子诊断，所需时间短，但现有核酸分子扩增技术也存在一定的局限性，尤其是难以快速检测和确定多药耐药病原菌的耐药基因突变部分。