白芍提取物实验方案设计.docx

白芍提取物实验方案设计白芍的有效成分为芍药甘、白芍甘、氧化芍药行和苯甲酰芍药昔等单菇类化合物，简称白芍总件0根据文献报道，在实际生产中常用一定浓度的乙醉或水提取，通过对芍药音的溶出率进行比较，发现以70%乙醉提取白芍测得芍药昔含量最高。采用大孔吸附树脂对白芍提取物进行分离、纯化,其中对白芍提取物中首类成分分离纯化效果良好，可除去淀粉等杂侦。本研究通过正交试验设计和单因素考察相结合的方法，以主要有效成分的含量作为评价指标,探讨r白芍总件提取和纯化的工艺。工艺流程，白芍（饮片）I6倍量70%乙醉回流提取三次,每次3h,合并提取液提取液I过戏,浓缩至一定浓度DIOI树脂柱先用054氨水洗柱，再用水洗至中性，再用30%乙醇洗脱，收桀洗脱液洗脱液I回收乙醉并浓缩、蒸干白芍总音粗提物一、药材的选择白芍为2005年版药典收载的药材，为了选择含量和定、收率高的适宜药材，分别对同仁、古深、修正、吉林大药房四家药店的药材进行J'比较和选择，芍药昔含量测定方法参照05年版药典。二、提取工艺优选1、提取溶剂比较70%乙N为可潦提取和水煎煮的比较”2、醉提工艺优选主要考察提取时加醇量，提取时间及提取次数作为考察因素，每个因素设计三个水平，试验方案见表1。表11.9（3"正交试险设计因素水平表水平加酹量A（倍）提取时间B（三）提取次数C（次）I4I126223833实验结果以出膏率和芍药总件含量作为评价指标，并对试验结果进行方差分析，确定最佳提取工艺条件。3、大孔树脂纯化工艺的选择（1）吸附容量的确定是取待上液，分次通过预先处理好的大孔树脂柱.确定柱床体积，分段收集潦出液，用薄层层析法对流出液进行鉴别，确定最大吸附量。（2）乙醇洗脱溶剂的选择分别选择10%、20%、30%,40%、50%、60%、70%乙醇洗脱大孔树脂柱,用薄展法对流出液进行鉴别.（3）斌水洗脱体积和乙醉洗脱体积的确定分段收集流出液，对流出液进行薄层鉴别，确定洗脱体积。（4）流速的确定选择适宜的流速，画定每分钟流S1.三、白芍提取工艺的确证按照拟定的制备工艺制备三批样品，对样品中芍药讨和总音进行含量测定，根据白芍材料及成品中芍药甘含量和成品得率，计算提取物样品芍药计转移率。四、含量测定方法芍药昔含量测定方怯参照05年版药典。总昔采用碱水解法，参照文献以高效液相来测，通过系统适应性实验确定提取物总伴含量的测定方法：色谱条件色谱柱:GB（250mm×4.6m,511）;柱温30'C;流动相：乙脂-0.1%磷酸（25：75）;检测波长：230所；流速：1.0nlnin.对照品的制备精密称取苯甲酸对照品，加水制成浓度为每Im1.含10g的苯甲酸对照品溶液.样品的制备精密称取白芍总甘提取液相当于02g药材,应蒸发皿中蒸干残渣加娼NaOH溶液10ml,溶解，精密量取05ml至10ml容量瓶中，加入乙脑-0.战磷酸（25：75）8ml,摇匀，再加1mol/1.的盐酸调节PH值为6,用流动相定容至刻度,摇匀,过戏,取续灌液,即得五、白芍提取物质量标准研究I、芍药昔的含量测定2、方法学考察（1）线性范围考察（2）精密度考察（3）重现性试验（4）秘定性实验（5）加样回收率实验