BD调节性T细胞.docx

关于调整性T细胞不同的亚群，类似的功能调整性T细胞(Tregs)在维持机体免及平衡方面R有特别求要的作用,Tegs通过抑制其他T细胞的功能而抑制免疫反应.些自!免疫性疾病如多发性硬化症、活动性类风湿性关节炎、I型助尿病等Trcgs的数星和功能均会发生改变.在很多恶性佚病如肪.秧捌和乳腺娓等已经发觉Tm须明显增高，Trcgs也尔断抗肿篇免疫反应从而导致死亡率上升，CD4和CD8TrcgsTregS口诂确定的两个主要类别为：CD4TregsCD8Tregs.CD4Tregs分为两类：“自然'Tggs(nTregs),其表达CD25和FoxP3:和适应性或者称为i秀导性TregS(iTgg$).自然Tregs源自阳腺的CD4细胞，该细胞CD25强阳性并农达转录因子(和系标记)FoxP3.nTregs约占总CD4T细胞的5/0%,并可以在T淋巴细胞发回的单阳性阶段首先出现,：他于具书与自身抗原的高亲和力而被阳性选择,该f.i号传递时坳过T细胞受体和胸腺荔质细胞上的带有自身抗旗肽的MCH-II2合体相”作用传诙nTregsW广细府因了非依靠型.适应性或诱导性Trcgs来源于胸腺CD4单阳性细胞,他们分化为CD25和FoXP3表达的Tregs(iTregs)须要有足终的同源抗原和特弁的见投调整因了如TGF,I1.-IO及II.-4则澈.Knp3是目前Trrs最特异的标记，尽管有报道小部分Tregs中FoXP3阴性.转录因子FoXp3作为Tregs标记的发觉使科学家们能够更好惚确定Tregs细胞群并且.发觉包括CD127在内的其他的TregS标记，CD127的发觉从BarbaraFazckasdeSt.GnHh(镰症上学与细1他生物学探讨所，悉尼，澳大利亚)JeffrvyBWeMone<UCSF的轴尿病中心，旧金山，加州，美国)试验室的探讨和BD生物科学试验室证据龙明CD127在两壑件T细胞的表达是下调的,与FOXP3的友达呈负相关.而且,网整性T细胞在表达高和低水平CD25的细胞群中也是以不同水平存隹的，CD127的发觉供应了TregsffJ个新的表面标记"从而可以通过波式细施仪分选活的Tre即进步进行下游分析.CD127是异构11.-7受体的部分，异构I1.7受体是由CD127和通用Y链组成，琏在其他细胞因子受体(I1.-2R.I1.-4R.II.-9R.I1.-I5RWI1.-2IR)也存在，CD127衣达于胸腺细胞、T和B祖细胞、成熟T细胞、单核细胞以及些其他的淋巴细施和骨骼细胞E.有探讨显示I1.-7R在成熟T细电增殖和分化过程中其中要作用,体外试脸表明，CDI27的表达随着Tfffl胞活化而下调,"这是因为FoXp3与CDI27启动子相互作用从而降低TregS的CD127衣达."Treg亚群白烈湖整T细他（nTr*s）诱导调整Tfa祖（iTregs）jnTregsTriT3显型CD4+CD25-5CDWCD4CD25CD4CD25fromCD25ecurM>rs共他协助标记C1.A4.GiTRFoxP3CDl27wCD25k*tru,CD45RBk*,FoXP3CD25,r-w,i*k.CD45RBu-.RnP3抻IMContactdependent,KranzynwBckpendenumakesTGF-ThroughcylokinesproducesI1.-IOThroughcytokines,r<xiucesTGF把班朋APCandTeffectorcellsTeftetcircellsNoiye(IdeiniGed包含CD28ThymicdevelopmentandmaintenanceinperipheryNotfordevelopmentorfunctionNotinvolved体内作用Suppressionofautorca<(ivcTccllsMucosalimmunity,inflammatoryresponseMucosalimmunity.inflammatoryresponse体外Expandableusing增TCR.CD28stimulationand!1.-2调整性T细胞的鉴别CD3.I1.-10.rehnokacidCD3.TGI-FoxP3：经典的Tregs标记尽管已有多种标记可以用于TregS的签别，但在FOXP3发觉之前尚未有特异的TregS标记.目前，FOXP3作为唯,的Tregs特异标记己羟在Sakaguchi和Rudensky的探讨中报道过，FoxPS（也称S<urfin.IPEX和JM2）是转录因子tbrkhcad或WingCdhdiX家族的转录抑制因子。它在全部C2Tm龄中表达，并具有调察活性，FOXP3的突变与以遗传性自身免及性皮屑疾病和人的IPEX疾病（免疫调柜弁样，多发内分泌疾病和肠病,X-染色体踪合症）亲击相关.'*IxP3对于确定分选出的TregS的纯度和产价,及鉴定确定的TregS都特别有用，伯是，它不适用于分别活的TNgs,因为FOXP3的姿色必须要固定细胞并破膜，所以这CD127是更好的选择，FoxP3染色来自FBD生物科学的人FoP3服克隆抗体（克膏259D/C7）与人FOXP3转录因子全部己混定过的业型都能反应,并J1.也与琳眠、恒河撤和稿族有交叉反应.BDPhanningen的人FOXP3抗体和级冲液试剂盒是一裨高效地用来检测FoxP3阳性TregS的试办；这件荷沽易行的织冲液体系可以使探讨者只用很少的步躲就能完成细胞固定和破眼。但假如用冻存样抽的方法至少需72h,支持新的目标标记列表FoXP3是种常常用于调生T细胞鉴定、分别和表征的标记物.但是，Tegs依旧是目前探讨的热点，并且文献中发发了新里目标标记物的列衣.为了支持这些新的发觉，BDBioscience也不断地研发HI新的制质址试剂和溶液，CD39：增加TregS的饕别以前探讨发觉CD39l-.fJB细胞.树突细胞和某些T细胞亚里，现在的探讨表明CD39与FoXP3共表达于人和小区的CD4Tregs4这一发觉也增加到Tregs不断增加的表面标记物列表中，列表中有诸如CD25、CD45RA,H1.A-DR和CTIA4等表面标记物，这些标记物对于CD4Tregs的识别和功能鉴定是至关重要的.细胞外ATP和它的代谢产物是谢案大部分细胞和器官功能的有效调整分子，细胞ATP和放的是组织破环的标记和激活免疫系统的种危急”信号CD39水解细胞外ATP(或者其他;磷胶甘)成为相点的核甘酸,如AMP等.细胞外的单璘酸核针很好被可溶性或者膜结合的5'外段级险(CD73)降解为核件(如忠许.然后，细胞外周的腮背介导抗炎症性的T细胞反应，CD39和CD73的共农达被认为是TmgS介导免疫抑制的个关键机制，”BDPhamiingcn的抗人CD39(CloneTU66)电克隆抗体是人TrCgS的新型标记物.并且供应PE及APC标记的即用里流式细胞术试剂盒，T066能鲂识别ENTPD1,ENTPDl½-种胞外酶属于核流：蝎酸；磷酸解类家族(ENTPDasc).该家族的成员参加胭外核仃酸的分解代谢,限制胞外核音磷酸的"(NTPs)CD152(CT1.A-4)细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CT1.A-4或CD152)在对TmgS的抑制功能中是至关重婺的，在Zheng等人的一项探讨中，格CD1S2转染CD2SFoxP3T细胞，得到具有抑猊功能且并不表达FoxP3.其也探讨姐的探讨也表明,阻断CD152也破弱TrCgS细胞的抑制活性，CD152的异样表达在自身免度疾病如风湿性关节炎等中也有肯定作用,-CDI52在网突细胞中介导抑制活性是通过下阳树突细胞CDSO和CD86的我达.进而影响抗原匕递细胞激活其他T细胞的实力。M关于CDI52的探讨促进了我In对尸Tregs功能的理解.已知的Tregs细胞类型，现行的标记物以及新兴的标记物将极大地促进TrCgS探付的新发觉.已有报道的人类调整性T细胞标记这份表格集煽了人类调整性T细悒探讨的中呆,常用到的试剂.我们的试剂品种在不断扩展敬请访问bdbiosticnccs.,trcg来获得最新产品信息，抗原人炎表型参考文献编号CCR4positive21,22CCR6positive22CCR7positive23CD4positive12.24.25CDIIahi£h26.27CD25positive28CD39positiveandnegativesubsets29C>45RApositive30C1.>45ROpositive31CD46positiveIOCDM(ICAM-I)highCD621.lowandhighSUbse32CIX9positive33CDI03positive34CDI22(I1.2RP)>sidveCD127low5.6CDI34(OX-U)Ipositiveandnegativesubsets35CDI52(CT1.A-4)high36.37CDI54(CD4OI.)Po疝ive38CD2231.AG3positive39.40.46CXCR4positive33CXCR5positive33CXCR6osi(ive33FoxP3positive41.42GlTRhigh43GPR83osi(ive44GranzyineBpositive45I1.-IOpositive46I1.-35positive47MHCIIpositive48NeuiopilinIPCrforinTGF-siivepositivepositive49CNMricMctliIMKOiPwacros11c3ftdC0U7Ptto.3HtfkMkemMojbeteMMinutMMgAMZdartIWnhW4bJrk5fkkDSUifMdcAISonUW>cdlHMBoecUwICCHVWTF。Ik川匕调整性T细胞的富集利用CD4、CD25和CD127富集TrCgSTregs含量低,为了下游试蛤泊集往往是必要的，己有几种富集全部TregS或其死群的方法.虽然FOXP3足口须公认的Tm2最特异的指标.但因其位广细胭内而因制了它在分别活的TmgS中的桃Hl.其他用干富集的有阴性选择的.阳性选择的或联合运川.-种已报道的阴性选择方法是除去表达CD127和CD49d的细电，"阳性选择是收集表达CM阳性和CD25强阳性的细胞,联合的方法包括在细胞分选前运川海.珠除去程目的细胞群，个最好的富集方法是收集CD4、CD25和CDI27细胞.利用CD4和CD25富集Trcgs在人类，最初的Tregs亚群的分析表明只有体外高水平表达CD25（约占总CD4T细胞2-3%）的细胞在体外才有抑制功能，”这是相对于把岛表达CD2