bfgf诱导的增殖人晶体上皮细胞内ca2调控的初步分析.docx

bfgf诱导的增殖人晶体上皮细胞内ca2调控的初步分析鲤透壁曲！蛇堕2、!垫缝！：廛纳嫂幽£垦！：必控曲垂！生业塞生望地bFGF诱导的增殖人晶体上皮细胞内Ca2+调控的初步探讨门1科人学附属第医院眼科t探讨7I-：曲勃导师：张劲松教授中文摘要白内障为世界上致盲疾病之首，但目前为之有效的治疗手段仍旧足术治疗。但术后，许多患者出现了晶体后囊混浊，即后发性白内(pc。)、导致视力再度下降。虽然手术或激光后囊切开足一较为有效治疗方法，但后囊膜的开通可导致视网膜脱离、黄现水肿等严峻的并症，为患者再次造成苦痛和损失。因此，如何预防和药物治疗白内障后发障是目前眼科工作者蚂待解决的迫切问题。己证明，术后晶体上皮细胞(1.EC)的残留和增殖是后囊膜混浊形成基础。生长因子(GF)在此过程中发挥着极为重要的作用，足进术后1.EC增殖，分化，移行引起后发障的主要因素，其中bFGF作用尤为突出。探讨发觉：晶体细胞内钙也有着明显地促晶体上皮细胞生长作用：子如EGF、PDGF、bFGF对某些细胞内ca2+有肯定的调整作用；而钙子也有肯定的调整作用，在一些试验中发觉细胞内Ca2+的释放也可增神经元内bFGF的表达。二者在细胞1勺信号转导和细胞增殖、分化者相互作用。基于以上背景我们作出大胆推想：在晶体上皮细胞中，GF对ca定的调整作用，这种调整引起的钙动员可能也参加了GF促细胞增殖挥着协同的作用。因此，找出GF与ca2+的关系，发觉它们的作用方阻断两者在晶体上皮细胞增殖过程中的相互作用，将为白内障尤其是和治疗供应更为广目的思路。为证明所作推想，本试验从晶体上皮细胞内钙库通道三磷酸肌醇受RyanOdine受体(RyR)入手，首先判定它们在人晶体E皮细胞(H1.达，推断它们在H1.EC内ca2+调整中的作用，然后用bFGF诱导检测bFGF对H1.EC内ca2+、IP3R、RyR的作用,最终通过药理反对H1.EC内2+的作用途径叫：透置曲！蛇堕ZX!量缝f：堕细蝗由！童：麴控曲超垄虹童g!塞j坚为进步药物阻断GF与ca2+之fhj的=I瓦作用从而抑制晶体J：皮细胞的增殖供应了理论基础。方法第一部分：1、人晶体上皮细胞系传代培育2、取第三代细胞，TRIzol试剂提取H1.EC内和各受体距型阳性！暇组织内总RA（阳性比照组织选自足月死婴）,RTPCR方法检测H1.Ec内IP3R1.IbIII和RyRI,H,III1亚型mRNA的表达。各引物根据NCB!公布的人类以上各受体InRNA序列及应用软件Primer3所得。试验均重复四次，KodakIDdi武alscience凝胶图像分析软件分析凝胶电泳结果，计算目的基因mRNA的相对含量，作两样本均数差异的t检验。3、取同代细胞传代与30mm培育.