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【医学PPT课件】致畸试验 妊娠母体接触某些具有致畸作用的化学物质，妊娠母体接触某些具有致畸作用的化学物质，对于处在器官形成期的胚胎发育可产生不良影响，对于处在器官形成期的胚胎发育可产生不良影响，使胎仔形态结构发生缺陷而呈现畸形。因此，可使胎仔形态结构发生缺陷而呈现畸形。因此，可以通过观察妊娠母体在敏感期接触受试物后胚胎以通过观察妊娠母体在敏感期接触受试物后胚胎及胎仔的发育状况来评价某种化学物有无致畸作及胎仔的发育状况来评价某种化学物有无致畸作用。用。手术用剪刀、无齿镊子、单面刀片。手术用剪刀、无齿镊子、单面刀片。上皿天平（感量上皿天平（感量0.1g0.1g）。）。游标卡尺。游标卡尺。玻璃标本瓶、平皿。玻璃标本瓶、平皿。实体显微镜。实体显微镜。器材器材生理盐水（灭菌）。生理盐水（灭菌）。80%80%乙醇。乙醇。BouinBouin固定液。固定液。茜素红茜素红S S染色液。染色液。透明液。透明液。试剂试剂实验步骤实验步骤1. 1. 动物选择动物选择2. 2. 剂量分组剂量分组 3. 3. 染毒染毒4. 4. 孕鼠状况观察孕鼠状况观察5. 5. 动物剖检动物剖检p动物选择：动物选择：致畸试验中动物应选择，食性和对受试物致畸试验中动物应选择，食性和对受试物代谢过程与人类接近，体型小、驯服、容易饲养和易繁代谢过程与人类接近，体型小、驯服、容易饲养和易繁殖及价廉外，还应特别注意妊娠过程较短、每窝产仔数殖及价廉外，还应特别注意妊娠过程较短、每窝产仔数较多和胎盘构造与人类接近的动物。较多和胎盘构造与人类接近的动物。阴栓阴栓显微镜下观察到的精子显微镜下观察到的精子各类胎仔特征各类胎仔特征摘出子宫连同子宫内胎仔一起称重，称为摘出子宫连同子宫内胎仔一起称重，称为“窝窝重重”。剖开子宫及羊膜，逐个钳住剪断脐带，取出。剖开子宫及羊膜，逐个钳住剪断脐带，取出胎仔，剥离胎盘，称胎盘重量。胎仔，剥离胎盘，称胎盘重量。窝重窝重= =仔鼠重仔鼠重+ +羊水羊水+ +胎盘胎盘净增重净增重=20d=20d重重-6d-6d重重- -窝重窝重（2 2）窝重）窝重头部头部躯干躯干四肢四肢无脑无脑脊柱裂脊柱裂前或后肢形成不全前或后肢形成不全脑膨出脑膨出脊髓膨出脊髓膨出多指（趾）多指（趾）小脑小脑胸骨裂胸骨裂少指（趾）少指（趾）颌面裂颌面裂腹裂腹裂畸形手（足）畸形手（足）开眼开眼所肛所肛并指（趾）并指（趾）单耳鼻单耳鼻卷尾卷尾短指（趾）短指（趾）无耳无耳短尾短尾无颚或小颚无颚或小颚无尾无尾兔唇兔唇无颌或小颌无颌或小颌（3 3）外观）外观首先观察是否有水肿、皮下淤血，然后从颈、胸腹、脊首先观察是否有水肿、皮下淤血，然后从颈、胸腹、脊背到前后肢仔细观察记录背到前后肢仔细观察记录体重、身长、尾长体重、身长、尾长 （4 4）一般发育指标的测量）一般发育指标的测量（5 5）骨骼检查）骨骼检查 切面切面1 1：通过口经耳后作水平切通过口经耳后作水平切面，检查颚与舌。面，检查颚与舌。切面切面2 2：将切下的头部沿眼球中将切下的头部沿眼球中央垂直通过眼球做额状切面，检查央垂直通过眼球做额状切面，检查眼及嗅球。眼及嗅球。切面切面3 3：在切面在切面2 2与鼻翼间作垂直与鼻翼间作垂直额面切片，观察鼻道及鼻中隔。额面切片，观察鼻道及鼻中隔。切面切面4 4：在切面在切面2 2与后脑中间，检与后脑中间，检查脑、蛛网膜下腔及脑室。查脑、蛛网膜下腔及脑室。切面切面5 5：前肢上缘向后切前肢上缘向后切, ,观察气管、观察气管、食管和脊髓食管和脊髓切面切面6 6：前肢下缘向后切，观察肺、前肢下缘向后切，观察肺、纵隔、心房、脊髓纵隔、心房、脊髓 切面切面7 7：剑突下向后切，观察肺、心剑突下向后切，观察肺、心室、心室中隔室、心室中隔 切面切面8 8：从脐至剑突从脐至剑突1/21/2处向后切，检处向后切，检查肺、横隔查肺、横隔 切面切面9 9：从脐向后切从脐向后切 ，观察肝、胃，观察肝、胃（小部分）（小部分） 56789（6 6）内脏检查）内脏检查致畸实验中可见的主要内脏畸形或异常致畸实验中可见的主要内脏畸形或异常头部头部胸部胸部腹部腹部嗅球发育不全嗅球发育不全左位心左位心肝分叶异常肝分叶异常无脑无脑右大动脉弓右大动脉弓无肾无肾脑室扩张脑室扩张心房（室）中心房（室）中隔缺损隔缺损肾积水肾积水脑室积水脑室积水食道闭锁食道闭锁马蹄肾马蹄肾无眼球无眼球肺发育不全肺发育不全输尿管积水输尿管积水小眼球小眼球肺叶融合肺叶融合无膀胱无膀胱鼻中隔缺损鼻中隔缺损膈疝膈疝无睾丸或无卵巢、子无睾丸或无卵巢、子宫或子宫发育不全宫或子宫发育不全 结果判定结果判定 100着床数死胎数吸收胎数母鼠妊娠期体重变化。母鼠妊娠期体重变化。平均着床数。平均着床数。平均活胎率。平均活胎率。着床后胚胎死亡率（着床后胚胎死亡率（% %）= =活胎仔平均体重、身长、尾长活胎仔平均体重、身长、尾长畸形（外观、内脏及骨骼）总数畸形（外观、内脏及骨骼）总数结果判定结果判定 100受检胎仔总数出现畸形胎仔总数100活胎仔总数畸形总数100妊娠母体总数出现畸胎母体数畸胎出现率（畸胎出现率（% %）= = 母体畸胎率（母体畸胎率（% %）= = 活胎仔畸形率（活胎仔畸形率（% %）= = 雌雄鼠交配后并非全部怀孕，大鼠妊娠率约雌雄鼠交配后并非全部怀孕，大鼠妊娠率约70%90%70%90%，小鼠妊娠率较大鼠低。小鼠妊娠率较大鼠低。 不同季节，饲养条件不同，妊娠率亦不同。不同季节，饲养条件不同，妊娠率亦不同。 实验组怀孕率明显低于对照组时，对于实验组怀孕率明显低于对照组时，对于“未受孕未受孕”的结论，应予谨慎考虑应查明是否是因受试物有较强的结论，应予谨慎考虑应查明是否是因受试物有较强的胚胎毒作用。的胚胎毒作用。注意事项注意事项