细胞生物学实验.pptx

实验一、几种光学显微镜实验一、几种光学显微镜的使用的使用一、实验目的：一、实验目的：了解几种光学显微镜的结构、使用了解几种光学显微镜的结构、使用方法、工作原理等。方法、工作原理等。掌握使用普通光学显微镜提高分辨掌握使用普通光学显微镜提高分辨率的方法。率的方法。二、实验原理二、实验原理1 1、基本原理、基本原理一般光学显微镜主要是由目镜、物镜、一般光学显微镜主要是由目镜、物镜、聚光器以及反光镜等构成。聚光器以及反光镜等构成。各种光学显微镜的放大原理基本相同，各种光学显微镜的放大原理基本相同，各种特殊用途的显微镜只是在主要器各种特殊用途的显微镜只是在主要器件上进行了稍微改动而已。件上进行了稍微改动而已。2 2、几种光学显微镜、几种光学显微镜1 1、普通复式光学显微镜：其重要的性能参数是分辨率。、普通复式光学显微镜：其重要的性能参数是分辨率。2 2、暗视野显微镜：具有特殊的聚光器。光源中心束不直、暗视野显微镜：具有特殊的聚光器。光源中心束不直入物镜，所以视野灰暗。而被检测细胞由于光的衍射及入物镜，所以视野灰暗。而被检测细胞由于光的衍射及反射而较亮反射而较亮3 3、相差显微镜：利用光的干涉原理。在物镜与聚光器上、相差显微镜：利用光的干涉原理。在物镜与聚光器上做了改动。把肉眼看不见的相位差改为可见的振幅差，做了改动。把肉眼看不见的相位差改为可见的振幅差，使人能够看清楚。使人能够看清楚。4 4、荧光显微镜：是在光镜水平上对细胞内特异的蛋白质、荧光显微镜：是在光镜水平上对细胞内特异的蛋白质、核酸、糖类、脂质以及某些离子等组分进行定性定位研核酸、糖类、脂质以及某些离子等组分进行定性定位研究的有利工具。究的有利工具。普通复氏显微镜普通复氏显微镜暗视野显微镜暗视野显微镜相差显微镜相差显微镜荧光显微镜荧光显微镜3 3、如何提高显微镜、如何提高显微镜分辨率分辨率1 1、数片孔径：孔径愈大，显微镜能力俞强。、数片孔径：孔径愈大，显微镜能力俞强。2 2、分辨率：分辨率以分辨俩点之间的最小距离表示。、分辨率：分辨率以分辨俩点之间的最小距离表示。目镜与显微镜的分辨率无关，物镜的分辨率即为显目镜与显微镜的分辨率无关，物镜的分辨率即为显微镜的分辨率，照明光线波长越短，物镜的数值孔微镜的分辨率，照明光线波长越短，物镜的数值孔径越大显微镜的分辨率的越大。径越大显微镜的分辨率的越大。3 3、放大率：总放大率超过物镜数值孔径的、放大率：总放大率超过物镜数值孔径的10001000倍时，倍时，细微结构分辨不清，为空的放大，细微结构分辨不清，为空的放大，低于低于500500倍时由于放大率过低，肉眼难以分辨。倍时由于放大率过低，肉眼难以分辨。4 4、焦点深度：焦深加大，总放大率提高。、焦点深度：焦深加大，总放大率提高。三、实验器材三、实验器材观察材料（草履虫，洋葱内表皮，紫鸭趾观察材料（草履虫，洋葱内表皮，紫鸭趾草等花粉，菠菜叶），普通光学显微镜，草等花粉，菠菜叶），普通光学显微镜，暗视野显微镜，相差显微镜，荧光显微镜，暗视野显微镜，相差显微镜，荧光显微镜，载玻片，盖玻片，吸管，镊子，剪刀等。载玻片，盖玻片，吸管，镊子，剪刀等。四、实验方法四、实验方法1 1观察草履虫的外形、运动、纤毛、食物泡等。观察草履虫的外形、运动、纤毛、食物泡等。取少许棉花纤维或擦镜纸纤维，放于载玻片上，在取少许棉花纤维或擦镜纸纤维，放于载玻片上，在其上滴一滴草履虫悬液，然后加盖玻片观察。其上滴一滴草履虫悬液，然后加盖玻片观察。2 2洋葱表皮细胞和菠菜叶的细胞核、叶绿体的观洋葱表皮细胞和菠菜叶的细胞核、叶绿体的观察在载玻片上滴一滴水，撕洋葱鳞茎内表皮或菠菜察在载玻片上滴一滴水，撕洋葱鳞茎内表皮或菠菜下表皮一小块放于其中，使其展开，然后加盖玻片下表皮一小块放于其中，使其展开，然后加盖玻片观察。观察。3 3紫鸭趾草花粉外形、表面突起的观察在载玻片紫鸭趾草花粉外形、表面突起的观察在载玻片上滴一滴水，取紫鸭趾草雄蕊在其中沾几下，然后上滴一滴水，取紫鸭趾草雄蕊在其中沾几下，然后盖片观察。盖片观察。