肠杆菌科鉴定全.ppt

肠杆菌科一.分布9版伯杰鉴定细菌手册分为24个属，108个种现增加到31个属,常见的15个属 1.占临床分离菌总数50%2.占G-杆菌总数80%3.占败血症50%4.占尿路感染70二.临床意义l有些菌属对人类有明显的致病作用有些菌属对人类有明显的致病作用n1、鼠疫耶耳森菌-引起烈性传染病n2、埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶耳森菌属可导致腹泻、食物中毒.伤寒l有些菌属与医院感染有关有些菌属与医院感染有关n1、肺炎n2、脑膜炎n3、菌血症n4、各种部位的感染l多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌n与人类感染有关的肠杆菌科细菌有与人类感染有关的肠杆菌科细菌有31个菌属，个菌属，其中临床标本中常见的菌属有其中临床标本中常见的菌属有15种种 克雷伯菌属克雷伯菌属 爱德华菌属爱德华菌属 邻单胞菌属邻单胞菌属 变形杆菌属变形杆菌属 普罗威登斯菌属普罗威登斯菌属 沙门菌属沙门菌属 耶尔森菌属耶尔森菌属 志贺菌属志贺菌属 沙雷菌属沙雷菌属 肠杆菌属肠杆菌属 埃希菌属埃希菌属 哈夫尼亚菌属哈夫尼亚菌属 枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属 摩根菌属摩根菌属 多源菌属多源菌属 三.微生物特性n1.G-杆菌，多数有鞭毛、菌毛n2.发酵葡萄糖，兼性厌氧n3.氧化酶阴性4.4.还原硝酸盐为亚硝酸盐还原硝酸盐为亚硝酸盐5.5.触酶（）触酶（）6.6.营养条件不高，拉丝试验拉丝试验涂片：涂片：G-b氧化酶试验氧化酶试验非发酵菌、弧菌非发酵菌、弧菌+肠杆菌科细菌、不动、嗜麦芽菌肠杆菌科细菌、不动、嗜麦芽菌双糖试验双糖试验FO不动、嗜麦芽不动、嗜麦芽肠杆菌科细菌肠杆菌科细菌苯丙苯丙,葡盐葡盐,枸枸,硝硝,赖赖,鸟鸟,氨氨对对,山山,肌肌,侧侧,吲哚吲哚 硝酸盐还原硝酸盐还原+嗜麦芽嗜麦芽不动不动四、四、鉴鉴定定流流程程图图种属鉴定种属鉴定科的特征科的特征硝酸盐还原硝酸盐还原葡萄糖发酵葡萄糖发酵氧化酶氧化酶 触酶触酶属间鉴定特征属间鉴定特征属内种间鉴定特征属内种间鉴定特征血清学分型血清学分型报告细菌种名报告细菌种名报告细菌血清型报告细菌血清型概概述述分子生物学鉴定分子生物学鉴定五、肠杆菌科的初步分群 n可用苯丙氨酸和葡萄糖酸盐试验将肠杆菌科分为四大组 菌 属 名 苯丙氨酸 葡萄糖酸盐变形杆菌属 +普鲁维登斯菌属 +摩根氏菌属 +塔特姆菌属 +克雷伯菌属 +肠杆菌属 +多源菌属 +沙雷菌属 +西地西菌属 +哈夫尼亚菌 +埃希菌属 志贺菌属 沙门菌属 枸橼酸杆菌属 爱德华菌属 耶尔森菌属 克卢瓦菌属兰恩氏菌属 +六.苯丙氨酸阳性组的各属鉴别 n试 验 变形杆菌属 普鲁维登菌属 摩根氏菌属 塔特姆属nH2S +-n枸橼酸盐 +/-+-n靛基质 +/-+-1.变形杆菌属内各种的鉴别 试 验 普通变形杆菌 奇异变形杆菌 潘氏变形杆菌 产粘液变形杆菌靛基质 +-鸟基酸 -+-木糖 +-2.普鲁维登菌属各种的鉴别 试 验 产碱 斯图 雷极 普鲁维登斯菌 普鲁维登斯菌 普鲁维登斯菌侧金盏花醇 +-+甘露醇 +-生化反应生化反应雷氏雷氏斯氏斯氏产碱产碱拉氏拉氏海氏海氏吲哚产生吲哚产生+-肌醇肌醇 +-V海藻糖海藻糖-+-戊五醇戊五醇+-+-+3.摩根菌属种的鉴定 试验试验 摩根摩根菌 摩根菌(生物1群)赖氨酸赖氨酸 -+动力动力 +-4.塔特姆菌属的鉴定 苯丙氨酸 H2S 枸橼酸盐 鸟氨酸 靛基质 +-+_+苯丙氨酸+H2S枸橼酸盐靛基质鸟氨酸靛基质侧金盏花醇甘露醇普通变形杆菌奇异变形杆菌潘氏变形杆菌产碱普鲁维登斯菌雷极普鲁维登斯菌斯图普鲁维登斯菌摩根菌塔特姆菌.苯丙氨酸阳性组菌属鉴别索引图5-七.葡萄糖酸盐阳性组各属鉴别 试 验克雷伯菌属沙雷菌属 肠杆菌属 哈夫尼亚菌属 多源菌属 动 力-+DNA酶-+-鸟氨酸-+-枸橼酸盐+-+u原克雷伯菌属（原克雷伯菌属（klebsiella）有）有5个种，个种，2个亚种个亚种肺炎克雷伯菌（肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）产酸克雷伯菌（产酸克雷伯菌（K.oxytoca）解鸟氨酸克雷伯菌（解鸟氨酸克雷伯菌（K.ornithinolytica）植生克雷伯菌（植生克雷伯菌（K.planticola）土生克雷伯菌（土生克雷伯菌（K.terrigena）分分 类类克克雷雷伯伯菌菌属属臭鼻亚种臭鼻亚种鼻硬结亚种鼻硬结亚种解鸟氨酸柔特勒菌（解鸟氨酸柔特勒菌（R.ornithinolytica）植生柔特勒菌（植生柔特勒菌（R.planticola）土生柔特勒菌（土生柔特勒菌（R.terrigena）柔特勒菌属柔特勒菌属(Raoultella)This proposal is base on 16S rDNA and rpoB gene sequencing and carbon assimilation studies.培养特征培养特征 血琼脂上菌落较大，呈血琼脂上菌落较大，呈黏液状，以接种环挑取黏液状，以接种环挑取时易拉成丝时易拉成丝 在肠道培养基上呈发酵在肠道培养基上呈发酵乳糖小菌落乳糖小菌落 在液体培养基内生长混在液体培养基内生长混浊、浓厚、可见菌膜，浊、浓厚、可见菌膜，管底有粘性沉淀物管底有粘性沉淀物 K.pneumoniae 菌落（血平板）菌落（血平板）克克雷雷伯伯菌菌属属1.克雷伯菌属各种的鉴别试 验产酸克雷伯菌肺炎克雷伯菌臭鼻克雷伯菌鼻硬结克雷伯菌靛基质+甲基红+丙二酸盐+克雷伯菌和柔特勒菌种间鉴定表克雷伯菌和柔特勒菌种间鉴定表生化反应生化反应肺炎肺炎克雷克雷伯菌伯菌产酸产酸克雷克雷伯菌伯菌解鸟解鸟氨酸氨酸柔特柔特勒菌勒菌植生植生柔特柔特勒菌勒菌肺炎肺炎克雷克雷伯菌伯菌臭鼻臭鼻亚种亚种肺炎肺炎克雷克雷伯菌伯菌鼻硬鼻硬结亚结亚种种土土生生柔柔特特勒勒菌菌脲酶脲酶+-吲哚产生吲哚产生-+-(-)(-)-鸟氨酸鸟氨酸-+-(-)(-)甲基红甲基红-(-)(-)+V VV-P+V V+-+丙二酸盐丙二酸盐+-+枸橼酸盐枸橼酸盐+V V-V V克克雷雷伯伯菌菌属属 S.marcescens菌落特征（普通营菌落特征（普通营养平板）养平板）沙沙雷雷菌菌属属 S.marcescens菌落特征（普通营菌落特征（普通营养平板）养平板）沙沙雷雷菌菌属属2.沙雷菌属各种的鉴别 试 验粘质沙雷菌液化沙雷菌 红色沙雷菌鸟氨酸+阿拉伯糖+分类：现有分类：现有13个种个种2个生物型个生物型u原有原有7个种个种2个生物型个生物型产气肠杆菌产气肠杆菌(E.aerogenes)阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌(E.cloacae)杰高维肠杆菌杰高维肠杆菌坂崎肠杆菌坂崎肠杆菌泰洛肠杆菌泰洛肠杆菌中间肠杆菌中间肠杆菌聚团肠杆菌聚团肠杆菌河生肠杆菌生物群河生肠杆菌生物群1河生肠杆菌生物群河生肠杆菌生物群2u后增加后增加7个菌个菌阿氏肠杆菌阿氏肠杆菌何氏肠杆菌何氏肠杆菌溶解肠杆菌溶解肠杆菌超压肠杆菌超压肠杆菌克沃尼肠杆菌克沃尼肠杆菌考伯肠杆菌考伯肠杆菌帕瑞勒肠杆菌帕瑞勒肠杆菌 肠肠杆杆菌菌属属3.肠杆菌属各种的鉴别 试 验坂崎杆菌 阴沟杆菌 产气杆菌格高菲杆菌赖氨酸+山梨醇+本菌属的细菌生化反应不典型，常用的商品化鉴定系统本菌属的细菌生化反应不典型，常用的商品化鉴定系统很难达到很难达到90以上的鉴定正确率以上的鉴定正确率肠杆菌属种间鉴定表肠杆菌属种间鉴定表生化反应生化反应产产气气杰杰高高维维帕帕瑞瑞勒勒聚聚团团河生，河生，生物群生物群1 1癌癌生生阪阪崎崎何何氏氏阴阴沟沟克克沃沃尼尼中中间间考考伯伯阿阿氏氏河生，河生，生物群生物群2 2溶溶解解超超压压赖氨酸脱赖氨酸脱羧酶羧酶+-山梨醇山梨醇+-V V-+VP试验试验+V VV V+-+七叶苷七叶苷+V V+-V V+V V+蜜二糖蜜二糖+V VV V+-+-+-+蔗糖蔗糖+V V+-+V V+-+-精氨酸脱精氨酸脱氢酶氢酶-+V V+-+V VV V+-鸟氨酸脱鸟氨酸脱羧酶羧酶+-V V+-V V+核糖醇核糖醇+-V V-鼠李糖鼠李糖+V V+-+-甲基甲基-D-葡萄糖葡萄糖苷苷+-V V-+V VV V-+黄色素黄色素-V V-+-V V-肠肠杆杆菌菌属属4.哈夫尼亚菌属鉴定n葡萄糖酸盐 枸橼酸盐 棉子 糖n +n5.多源菌属种的鉴定试验 聚团多源菌 弥散多源菌 赖 氨 酸 -鸟 氨 酸 -水扬苷 +-5.葡萄糖酸盐阳性菌属鉴别双岐索引图+-+葡萄糖酸盐+侧金盏花醇赖氨酸鸟氨酸赖氨酸鸟氨酸靛基质枸橼酸盐山梨醇丙二酸盐阴沟肠杆菌产酸克雷伯菌山梨醇肺炎克雷伯菌产气肠杆菌红色沙雷菌多源肠杆菌鼻硬结克雷伯菌臭鼻克雷伯菌哈夫尼亚菌山梨醇格高菲肠杆菌阿拉伯糖贩崎肠杆菌阴沟肠杆菌粘质沙雷菌液化沙雷菌八.苯丙氨酸葡萄糖酸盐阴性组的各属鉴别 试 验沙门菌属志贺菌属埃希菌属枸橼酸杆菌属耶尔森菌属爱德华菌属甘露醇+ONPG+动 力+枸橼酸盐+/+赖氨酸+枸枸橼橼酸酸杆杆菌菌属属分分 类类枸橼酸杆菌属（枸橼酸杆菌属（Citrobacter）包括）包括11个种个种弗劳地枸橼酸杆菌弗劳地枸橼酸杆菌(C.freundii)差异枸橼酸杆菌（差异枸橼酸杆菌（C.diversus）库斯枸橼酸杆菌库斯枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌(C.amalonaticus)（C.koseri）布拉吉枸橼酸杆菌布拉吉枸橼酸杆菌 （C.braakii）雷登枸橼酸杆菌雷登枸橼酸杆菌 （C.rodentium）塞拉克枸橼酸杆菌塞拉克枸橼酸杆菌 （C.sedlakii）魏克曼枸橼酸杆菌魏克曼枸橼酸杆菌 （C.werkmanii）扬哥枸橼酸杆菌扬哥枸橼酸杆菌 （C.youngae）吉乐枸橼酸杆菌吉乐枸橼酸杆菌 （C.gillenii）穆利枸橼酸杆菌穆利枸橼酸杆菌 （C.murliniae）法玛丽枸橼酸杆菌法玛丽枸橼酸杆菌 （C.farmeri）1.枸橼酸杆菌属各种的鉴别 试 验费劳地枸橼酸杆菌异型枸橼酸杆菌丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌鸟氨酸+侧金盏花醇+注意：很多鉴定系统的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类资注意：很多鉴定系统的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类资料料枸橼酸杆菌种间鉴定表枸橼酸杆菌种间鉴定表生化反应生化反应弗弗劳劳地地穆穆利利杨杨格格吉吉乐乐魏魏克克曼曼无无丙丙二二酸酸盐盐法法玛玛丽丽布布拉拉吉吉库库斯斯赛赛拉拉克克雷雷登登鸟氨酸脱羧酶鸟氨酸脱羧酶-+丙二酸盐利用丙二酸盐利用-+-+尿素水解尿素水解V VV V+-+V VV VV V+卫矛醇发酵卫矛醇发酵-+-V VV V+-KCN生长生长+-+-蔗糖发酵蔗糖发酵+V V-V V-+-V V-D阿拉伯醇发阿拉伯醇发酵酵-+-蜜二糖发酵蜜二糖发酵+V V-V V-+-+-枸枸橼橼酸酸杆杆菌菌属属2.爱德华菌属各种的鉴别 试 验迟缓爱德华菌保科爱德华菌鲶鱼爱德华菌H2S+甲基红+3.埃希菌属种的鉴别 试 验大肠埃希菌大肠埃希菌（不活泼株）葡萄糖产气+动 力+致泻性致泻性E.coli分为分为5类：类：肠毒素型大肠埃希菌肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)肠致病性大肠埃希菌肠致病性大肠埃希菌(EPEC)肠侵袭型大肠埃希菌肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)肠出血型大肠埃希菌肠出血型大肠埃希菌(EHEC)肠凝聚型大肠埃希菌肠凝聚型大肠埃希菌(EAggEC)埃埃希希菌菌属属临床意义临床意义(Clinical Significance)E.coli以肠道外感染多见，主要有泌尿系统感染以肠道外感染多见，主要有泌尿系统感染 E.coli中的致病菌株能引起各种类型的腹泻，根中的致病菌株能引起各种类型的腹泻，根据其不同的血清型别、毒力和临床症状据其不同的血清型别、毒力和临床症状鉴定要点鉴定要点u不活跃大肠埃希菌与志贺菌易混淆，需相互鉴不活跃大肠埃希菌与志贺菌易混淆，需相互鉴别别 醋酸钠醋酸钠葡萄糖葡萄糖铵利用铵利用粘质酸盐粘质酸盐产酸试验产酸试验大肠埃希菌大肠埃希菌志贺菌属志贺菌属埃埃希希菌菌属属大肠埃希菌大肠埃希菌 在中国兰平板上为蓝色菌落在中国兰平板上为蓝色菌落大肠埃希菌大肠埃希菌 在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落大肠埃希菌大肠埃希菌 在麦康凯和在麦康凯和SS平板上