设计性实验丹参注射液对垂体后叶素致心肌缺血的保护作用.ppt

设计性实验设计性实验 丹参对垂体后叶素致兔心肌缺血的丹参对垂体后叶素致兔心肌缺血的保护作用保护作用【实验目的实验目的】9/15/20232 学习用垂体后叶素造成急性心肌缺学习用垂体后叶素造成急性心肌缺血的实验方法，观察药物抗心肌缺血的实验方法，观察药物抗心肌缺血的作用。血的作用。【实验原理实验原理】9/15/20233垂体后叶素可使全身血管（包括冠状血管垂体后叶素可使全身血管（包括冠状血管）收缩，静脉注射后使动物产生急性心）收缩，静脉注射后使动物产生急性心肌缺血状态，出现心室肌静息张力的增肌缺血状态，出现心室肌静息张力的增加和发展张力的下降，以及心电图加和发展张力的下降，以及心电图STST段段及及T T波的变化，可作为冠状动脉痉挛，急波的变化，可作为冠状动脉痉挛，急性发作的心绞痛模型。性发作的心绞痛模型。垂体后叶素的注射剂量不同可引起不同程垂体后叶素的注射剂量不同可引起不同程度的障碍，剂量不大时，可迅速恢复，度的障碍，剂量不大时，可迅速恢复，因此可反复在同一动物身上进行多次实因此可反复在同一动物身上进行多次实验。验。【材料与方法材料与方法】9/15/20234一、实验动物：家兔一、实验动物：家兔1 1只只二、器材与药品：二、器材与药品：10ml10ml注射器，注射器，1ml1ml注注射器，手术台，婴儿秤，射器，手术台，婴儿秤，MedLabMedLab生物生物信号采集分析系统。垂体后叶素注射信号采集分析系统。垂体后叶素注射液，液，2020氨基甲酸乙酯，丹参注射液氨基甲酸乙酯，丹参注射液，生理盐水。，生理盐水。三、方法与步骤：三、方法与步骤：9/15/20235取家兔一只，称重，用取家兔一只，称重，用25%25%乌拉坦溶液，按乌拉坦溶液，按1g/kg1g/kg（4ml/kg4ml/kg）静脉注射麻醉，麻醉后将兔背位）静脉注射麻醉，麻醉后将兔背位固定于手术台上。固定于手术台上。正中切口颈部皮肤，分离右侧颈总动脉正中切口颈部皮肤，分离右侧颈总动脉,远心端远心端结扎，并在近心端夹上动脉夹，以阻断血流，结扎，并在近心端夹上动脉夹，以阻断血流，用虹膜剪作用虹膜剪作“V”V”形切口，将连于压力换能形切口，将连于压力换能器的已充满肝素生理盐水的心导管向心脏方器的已充满肝素生理盐水的心导管向心脏方向插入颈总动脉内，移去动脉夹，观察屏幕向插入颈总动脉内，移去动脉夹，观察屏幕显示先出现血压波形，继续将导管插向左室显示先出现血压波形，继续将导管插向左室腔。腔。3.3.当波形由血压波变成下沿达当波形由血压波变成下沿达0mmHg0mmHg附近具有附近具有明显舒张期而峰顶平坦的波形时，即表明导明显舒张期而峰顶平坦的波形时，即表明导管口已通过主动脉瓣进入左室腔内，再送入管口已通过主动脉瓣进入左室腔内，再送入导管约导管约0.20.20.4cm0.4cm，若还保持同样波形则可，若还保持同样波形则可把心导管结扎固定。把心导管结扎固定。4.4.将心电输入线的三个针形电报分别插入右前将心电输入线的三个针形电报分别插入右前肢及右、左后肢皮下，记录肢及右、左后肢皮下，记录IIII导联心电导联心电（或（或采用头胸导联）采用头胸导联）。5.5.MedLabMedLab生物信号采集处理仪参数设置：生物信号采集处理仪参数设置：记录方式：连续记录；记录方式：连续记录；存盘方式：连续存盘；存盘方式：连续存盘；第第1 1通道：通道：ACAC输入，放大倍数输入，放大倍数10001000；第第2 2通道：通道：DCDC输入，放大倍数输入，放大倍数200200；采样速率：采样速率：1ms1ms。9/15/20238 将头皮针连接在已注满生理盐水的将头皮针连接在已注满生理盐水的10ml10ml注射器上，然后注射器上，然后用头皮针头刺入耳缘静脉中，并用木夹或胶布固定。用头皮针头刺入耳缘静脉中，并用木夹或胶布固定。连续记录正常心室内压、心电。连续记录正常心室内压、心电。（左室内压峰值左室内压峰值：LVSPLVSP,mmHg,mmHg。由心室压基线到曲线。由心室压基线到曲线顶峰高度；顶峰高度；左室舒张末压左室舒张末压：LVEDPLVEDP,mmHg,mmHg。心室舒张。心室舒张末或收缩初室内压转折点到基线高度；末或收缩初室内压转折点到基线高度；左室内压正左室内压正负变化速率最大值负变化速率最大值：dp/dtmaxdp/dtmax,mmHg/s,mmHg/s。）。）LVSPLVEDP7.7.制作心肌缺血制作心肌缺血 由耳缘静脉注射垂由耳缘静脉注射垂体后叶素体后叶素1.5U/kg1.5U/kg（用生理盐水稀（用生理盐水稀释到释到3ml3ml），），3030秒注射完毕。并立秒注射完毕。并立即于注射后即于注射后20s20s、40s40s、1min1min、2min2min、5min5min、10min10min、20min20min、30min30min，分别记录心功能参数及心电图的变分别记录心功能参数及心电图的变化，特别注意观察心率、化，特别注意观察心率、STST段、段、T T波的变化。波的变化。8.8.待心功能参数及心电图恢复正待心功能参数及心电图恢复正常后，由耳缘静脉注射解救药常后，由耳缘静脉注射解救药物丹参注射液物丹参注射液2.5ml/kg2.5ml/kg，15min15min后再给同量的垂体后叶素后再给同量的垂体后叶素，观察上述同样时间内心功能，观察上述同样时间内心功能参数及心电图的变化。参数及心电图的变化。【实验结果】9/15/202311实验结果以曲线表示，对已记录的实实验结果以曲线表示，对已记录的实验结果进行回放重显、剪辑，对给验结果进行回放重显、剪辑，对给药前后的波形进行测量药前后的波形进行测量以表格形式记录实验原始数据以表格形式记录实验原始数据综合全实验室的综合全实验室的实验数据实验数据结果进行结果进行统计处理统计处理药物对垂体后叶素所致兔心肌缺血的对抗作用药物对垂体后叶素所致兔心肌缺血的对抗作用组别T波（mv）ST段（mv）心率（次/min）给药前给药后 给药前给药后给药前给药后垂体后叶素生理盐水组别LVSPLVEDP-dp/dtmax+dp/dtmax给药前给药后给药前给药后给药前给药后给药前给药后垂体后叶素生理盐水【注意事项注意事项】9/15/202313STST段上移多发生在注射垂体后叶素后段上移多发生在注射垂体后叶素后，立即至，立即至1.5min1.5min内，内，5min5min内恢复；内恢复；T T波升高常在注射后立即至波升高常在注射后立即至45s45s之间，之间，25min25min至至1 1小时，恢复正常。小时，恢复正常。参考文献：参考文献：1.1.苗戎苗戎,陈静陈静,韩力军韩力军,张莉张莉.复方丹参注射液复方丹参注射液对急性实验性心肌缺血左室舒张功能的影响对急性实验性心肌缺血左室舒张功能的影响J.J.天津中医天津中医 ,1998,(03),1998,(03)2.2.苗戎苗戎,陈静陈静,高岚高岚.复方丹参注射液对心肌缺复方丹参注射液对心肌缺血左室血左室dp/dTmindp/dTmin的影响的影响J.J.现代中西医结合现代中西医结合杂志杂志 ,1998,(07),1998,(07)3.3.魏砚明魏砚明,欧阳五庆欧阳五庆,张黎张黎,王俊王俊,申进宝申进宝.玉米幼芽提取物对垂体后叶素致家兔心肌缺血玉米幼芽提取物对垂体后叶素致家兔心肌缺血的保护作用的保护作用J.J.安徽农业科学安徽农业科学 ,2007,(07),2007,(07)附：配对样本均数的附：配对样本均数的t检验检验 所谓配对样本（所谓配对样本（paired sample）是指）是指两个样本中的观察对象由于存在某两个样本中的观察对象由于存在某种联系或具有某些相近的重要特征种联系或具有某些相近的重要特征而结成对子（而结成对子（matching），每对中），每对中的两个个体随机分配接受两种不同的两个个体随机分配接受两种不同的处理。的处理。主要有三种情况主要有三种情况医学研究中常见的配对样本：医学研究中常见的配对样本：配成对子的两个个体分别给予两种不同的处理配成对子的两个个体分别给予两种不同的处理（如把同窝、同性别和体重相近的动物配成一（如把同窝、同性别和体重相近的动物配成一对；把同性别、同病情和年龄相近的病人配成对；把同性别、同病情和年龄相近的病人配成一对等）；一对等）；同一个体同时分别接受两种不同处理（如同一同一个体同时分别接受两种不同处理（如同一动物的左右两侧神经、同一份标本分成两部分动物的左右两侧神经、同一份标本分成两部分）；）；同一个体自身前后的比较（如高血压患者治疗同一个体自身前后的比较（如高血压患者治疗前后的舒张压比较、肝炎患者治疗前后的转氨前后的舒张压比较、肝炎患者治疗前后的转氨酶比较等）。酶比较等）。对于配对样本数据，应该首先计算出各对于配对样本数据，应该首先计算出各对差值的均数。当两种处理结果无差对差值的均数。当两种处理结果无差别或某种处理不起作用时，理论上差别或某种处理不起作用时，理论上差值的总体均数应该为值的总体均数应该为0，故可将配对样，故可将配对样本资料的假设检验视为样本均数与总本资料的假设检验视为样本均数与总体均数体均数=0的比较，所用方法为配对的比较，所用方法为配对t检检验（验（paired t-test）公式：公式：9/15/202318其中，Sd为差值d的标准差例：例：用简便法和常规法分别对用简便法和常规法分别对12份份人尿进行尿铅含量测定，所得结果人尿进行尿铅含量测定，所得结果如表如表10-1。问根据现有资料能否说。问根据现有资料能否说明两种方法检测结果不同？明两种方法检测结果不同？利用利用Excel进行医学统计进行医学统计t检验分析检验分析单击单击“工具工具”菜单中的菜单中的“数据分析数据分析”命令可以浏命令可以浏览已有的分析工具。如果在览已有的分析工具。如果在“工具工具”菜单上没菜单上没有有“数据分析数据分析”命令，应在命令，应在“工具工具”菜单上运菜单上运行行“加载宏加载宏”命令，在命令，在“加载宏加载宏”对话框中选对话框中选择择“分析工具库分析工具库”。在进行两个样本均值相等假设分析时，可使用在进行两个样本均值相等假设分析时，可使用t-检验分析，根据情况选择：成对双样本均值分检验分析，根据情况选择：成对双样本均值分析、双样本等方差假设分析和双样本异方差假析、双样本等方差假设分析和双样本异方差假设分析。设分析。9/15/202322成对双样本均值的成对双样本均值的t-检验分析：检验分析：当样本中的观察值存在配对关系时，当样本中的观察值存在配对关系时，可以使用可以使用“成对双样本成对双样本t-检验检验”。例。例如对一个样本组在实验前后进行了两如对一个样本组在实验前后进行了两次检测，为确定实验前后样本均值是次检测，为确定实验前后样本均值是否相等，应使用成对否相等，应使用成对t检验。检验。9/15/2023239/15/2023249/15/202325数据录入：数据录入：数据分析数据分析分析时，在分析时，在“工具工具”菜单中，单击菜单中，单击“数据分析数据分析”命令。在数据分析对话命令。在数据分析对话框中，选择框中，选择t-检验：成对双样本均值检验：成对双样本均值分析，拉出成对双样本均值分析对分析，拉出成对双样本均值分析对话框话框9/15/202326选择输入项：选择输入项：9/15/202327其中有如下输入项：其中有如下输入项：变量变量1的区域：输入需要分析的第一个的区域：输入需要分析的第一个数据区域的单元格引用。该区域必数据区域的单元格引用。该区域必须由单列或单行数据组成。可单击须由单列或单行数据组成。可单击输入框右面的按钮，回到电子表格输入框右面的按钮，回到电子表格上自数据开始的单元格向结尾的单上自数据开始的单元格向结尾的单元格拖动。此时变量元格拖动。此时变量1的区域的区域(A1.K1)自动进入输入域中。然后单击输入自动进入输入域中。然后单击输入域右面的按钮，回到原对话框。域右面的按钮，回到原对话框。9/15/202328其中有如下输入项：其中有如下输入项：变量