亲和力试验标准操作规程.docx

亲和力试验标准操作规程一、目的当血型测试结果为混合视野时，测试亲和力以区分A3/B3等亚型和其他原因导致的混合凝集视野，如骨髓移植、疾病所致抗原减弱、输入异型血等。二、原理抗体亲和性指抗体与红细胞抗原混合后，出现肉眼可见凝集反应的时间。也就是指血清中抗体与相应红细胞发生凝集的强度与速度。血型抗体与具有相应抗原的红细胞接触后，开始出现肉眼可见凝集，这段时间一般以秒计数。可利用亲和力的不同来鉴别弱型抗原结合还是正常血型抗原结合的混合视野结果。三、适用范围适用于区分A3、B3等亚型与疾病所致抗原、骨髓移植、输入异型血液、妊娠出血等案例的结果分析。四、标本要求（1）EDTA、ACD>CPDA-I抗凝的全血。（2）标本量：至少ImIo（3）须加塞子在4。C下保存1周备查。五、试剂与仪器1.试剂人源抗-A、抗-B血清；2%的A、B、。型试剂红细胞。2.仪器普通离心机、血型血清学专用离心机、普通显微镜、计时器、洁净玻片、小木棍或TiP头、秒表、蜡笔或记号笔。六、操作步骤（1）观察标本是否适合本检验流程。（2）观察患者资料是否正确。（3）显微镜下确认是否为混合视野的反应。（4）取3组正常对照细胞及患者细胞，配制40%红细胞悬液。方法如下：Iml红细胞经IooOg离心1分钟后取压积红细胞。4滴压积红细胞加上6滴0.9%生理盐水，混合即成40%红细胞悬液。（5）取一张亲和力测试记录纸，依次填入患者基本数据及检验时间。（6）取一张玻片，以蜡笔填上患者姓氏及病历号。（7）玻片上使用记号笔画一个4cm2cm的椭圆形反应区，防止试剂或血液在混合摇晃时流出反应区域。（8）左右两端分别加入1滴抗血清试剂（抗-A/抗-B）及40%反应细胞（未靠近）。（9）利用圆形摇晃混合细胞及抗血清试剂，同时开始读秒计时。（10）观察玻片上血液稀少的那一端是否有凝集反应，当见到有凝集反应时就停止读秒并记录秒数。（11）患者标本检测3次，读秒3次，取平均值。（12）将结果记录在表格上。并将判读结果记录。（13）计算方法：检测3次后取平均值。七、结果判读（1）实验结果超过正常对照的3倍以上，则为A3或B3等亚型可能性大。否则可能是输入不同血型的混合视野，或骨髓移植血型，或因白血病患者造成的抗原减弱等情况。（2）若正常对照细胞平均值大于10秒，则需换不同品牌试剂重新测试。八、注意事项（1）溶血标本或脂血不适用本检查。（2）混合细胞及抗血清时就应开始计数时间。