脉冲场电泳仪操作规程.docx

脉冲场电泳仪操作规程1 .在电泳槽内加入约2.2升合适的电泳缓冲液。2 .打开主机开关，待主机自检结束后，打开循环泵开关，使电泳缓冲液开始循环，泵的速度设在“70”左右。然后开启冷凝系统开关，按“settemp”键设置所需电泳温度，按“actualtemp”显示实际温度。3 .灌胶，等胶凝固后，上样4 .待电泳缓冲液到达设置的温度后，将加好样的凝胶连同底座一起放入电泳槽内的黑色方框内，并保证电泳缓冲液超过胶面b2三,盖好电泳槽盖AUrOALGORITHM5 .在主机上设置电泳程序，先选择采用哪种类型程序，例如最常用的TWoState方法：FIGETWOSTATEMULTISTATE(1)按TWOSTATE键，屏幕显示aYouwilldestroythelastprogram-Goon?"，输入"1”确认后，系统显示/一、Gradient三VcmRunTime三IncludedAngle=0输入相应的参数后，按ENTER键,屏幕显示lnt.Sw.Tm=.FinSw.Tm=.IRampingfactor:a=.输入相应的参数后，按ENTER键确认(其中RamPingfactor默认是线性增长，如果欲采用默认值直接回车即可)。CHEFMapper屏幕会显示AProgramisinmemory.Pleaseenteranothercommand.若需存储程序，按SToREPGM进行存储。按STARTRUN即开始运行，此时可观察到电泳槽内电极开始出现气泡。(2)如选用autoalgorithm方法，按“autoalgorithm,键,键入欲得到的线性范围的最大片段和最小片段的kb数，确认所有给出参数，按“startrun”键，即可进行电泳。(3)如选用MUItiState及FIGE方法,请参阅说明书。6 .电泳开始后，“highVoltage”灯亮，此时切不可打开电泳槽盖进行操作，以免发生触电危险。7 .电泳结束后，"highVoItage”灯灭。依次关掉冷凝系统，主机开关，然后可取出凝胶，染色观察。最后放出使用过的电泳缓冲液，若长时间不用，需用蒸循水循环冲洗系统，晾干。8 .结束实验后，及时关闭仪器。