血糖的测 定　.ppt

血血 糖糖 的测的测 定定 实 验 题 目实验目的掌握血糖测定的原理和方法掌握血糖测定的原理和方法Folin-吴氏法测定血糖吴氏法测定血糖n全血经除蛋白后全血经除蛋白后nC6H12O6+CuSO4 碱性碱性 加热加热 CuO2 (兰色兰色)(砖红色砖红色)nCuO2可使磷钼酸还原成钼兰可使磷钼酸还原成钼兰.n如与同样处理的标准葡萄糖比色，即可求如与同样处理的标准葡萄糖比色，即可求出血中葡萄糖的含量。出血中葡萄糖的含量。实验原理n 1、除蛋白血滤液的制备除蛋白血滤液的制备 取试管取试管2支支:普通试管普通试管 (一支制备正常血滤液，一支制备高糖血滤液一支制备正常血滤液，一支制备高糖血滤液)加入加入 蒸馏水蒸馏水 3.5ml 血液血液 0.1 ml，(正常血正常血高糖血高糖血)2/3N H2SO4 0.2ml，10Na2WO4 0.2ml，混匀，待有澄清出现混匀，待有澄清出现(10min)过滤，收集滤液备用过滤，收集滤液备用(滤纸不用润洗滤纸不用润洗)。实验操作按顺序加按顺序加2、血糖含量的测定：血糖含量的测定：取试管取试管4支支 ，血糖管，血糖管编编 号号 标准管标准管 正常血管正常血管 高糖血管高糖血管 空白管空白管 标准葡萄糖液标准葡萄糖液2.0-除蛋白血滤液除蛋白血滤液-2.02.0-蒸馏水蒸馏水-2.0碱性铜试剂碱性铜试剂 2.02.02.02.0 充分混匀，置沸水中准确煮沸充分混匀，置沸水中准确煮沸8分钟，分钟，取出切勿摇动，置冷水中冷却取出切勿摇动，置冷水中冷却磷钼酸试剂磷钼酸试剂 2.02.02.02.0 混匀，放置混匀，放置3分钟分钟蒸馏水蒸馏水 3.03.03.03.0将各管混匀后，测定将各管混匀后，测定OD620,以空白管调零。以空白管调零。计算计算 n OD=KCLnOD测 KC测L C测 OD标 KC标L C标 C 测=OD测/OD标 C标n血糖（mg%）=OD测/OD标0.054/2100/0.1 =OD测/OD标100=n1、原始数据：、原始数据：各管的各管的OD值值n2、计算血糖值：写出公式，带入数据、计算血糖值：写出公式，带入数据 实验结果C正血（mg%）=OD测/OD标0.054/2100/0.1 =OD正/OD标100C高血（mg%）=OD测/OD标0.054/2100/0.1 =OD高/OD标100血糖测定的临床意义：n血糖血糖正常值正常值：80120mg。n当血糖超过当血糖超过120ms时，称时，称高血糖高血糖症；症；n若血糖低于若血糖低于70mg 称为称为低血糖低血糖症。症。n血糖增高多见于糖尿病，甲亢，肾上腺皮血糖增高多见于糖尿病，甲亢，肾上腺皮质机能亢进等质机能亢进等n而血糖过低，多见于胰岛素分泌过多，肾而血糖过低，多见于胰岛素分泌过多，肾上腺皮质机能减退，甲状腺机能减退等。上腺皮质机能减退，甲状腺机能减退等。实验讨论注意事项 1、本法所测得的血糖值，并非是真正的葡萄糖，滤本法所测得的血糖值，并非是真正的葡萄糖，滤波中还有其他还原物质的干扰（约波中还有其他还原物质的干扰（约10），），故结故结果偏高。果偏高。2、血糖测定应在、血糖测定应在取血后取血后2小时内完成，小时内完成，放置过放置过久，糖易分解，致使结果减低。久，糖易分解，致使结果减低。3、磷钼酸试剂宜贮于棕色瓶中，如、磷钼酸试剂宜贮于棕色瓶中，如出现兰色出现兰色，表，表明试剂本身已被还原，不能再用。明试剂本身已被还原，不能再用。4、碱性铜试剂中如出现、碱性铜试剂中如出现氧化亚铜沉淀氧化亚铜沉淀也不可用。也不可用。