Agilent-2100-DNA-1000-Kit.docx

Agilent2100DNA1000Assay操作手册准备胶染混合物警告：试剂含有DMS0,操作时注意防护！1 .DNA染料(蓝色盖)和胶(红色盖)在室温下平衡30min,注意避光。2 .涡旋染料IOs,离心,确保DMSo完全溶解。3 .吸取25ul染料到一管胶里面。染料重新避光保存于4o4 .胶染混合物振荡10s,或直到混匀。5 .转移胶染混合物到离心柱。6 .室温2240g±20%离心15mino7 .丢弃离心柱，离心管上注明日期。注意：胶染混合物足够使用10次。需要在4星期内用完。1小时内不用的时候，胶-染混合物避光保存于4o灌胶准备(1)将灌胶注射器的螺口连接到ChiPPrimingStatiOn上的注射器接口上，如下图所示将活塞拉至刻度“1ml”处。(2)打开ChiPPrimingStation,确认底盘的位置在“C”处，如下图所示，如不在，则需要将底盘卸下重新安装。（3）将卡扣移至最低一级，如下图所示灌胶（握住芯片时不能碰到芯片正反面）（1）将胶-染混合物避光30min,平衡至室温。（2）将一新芯片放入ChiPPrimingStation。（3）在带有标记的孔中加入9ul胶-染料混合物。该孔的位置为下图白点处。注意：在灌胶时要将枪头顶到芯片孔底部，而不能顶在孔壁上，如下图。W区因为胶-染料混合物粘性较大，该操作需要缓慢小心，以防产生气泡。(3)确认注射器活塞位于刻度“1ml处”，盖上ChiPPrimingStation压下活塞至卡扣处(听见“卡塔”一声)，扣住60s后，松开卡扣。松开卡扣后，活塞回弹。(4)活塞不再上升时，缓慢将活塞拉回Iml处，打开ChiPPrimingStatiOn。(5)在下图白点所示的芯片位置中加入93胶-染料混合物OoooOooo9lgel-dye注意：胶-染混合物1小时内不用时，要避光放在4。上样(I)力口marker：在下图白点所示的13个孔中加入5ulMarker(green)Oooe5lmarker(2)按照下图白点所示位置加入IUIIadderOooe Oooo O OO O1lladder（4）按照下图白点所示位置每孔加入IUl样品，样品不足，则用水替代。1lsample(5)将芯片置于IKAvortexmixer上2400rpm,涡旋60s。放入机器选好与芯片对应的程序选好结果保存位置和结果内参数输入样品编号确认无误后，点击start,开始运行QStart运行时，不要碰到仪器及台面。运行结束后，注意保存结果和清洗仪器。